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5xSuperBlot 无蛋白快速封闭液-100ml
基本售价：140.00元
【包装规格】产品编号 产品名称 包装 ES-8715 SuperBlot Protein-free Rapid Blocking Buffer(5×) 100ml/500ml 使用说明书 1份 【保存条件】常温运输，2-8°C保存12个月【产品特点】l快速高效：5~10 min快速完成封闭;只结合封闭转印膜而不结合蛋白，因此不会屏蔽样品蛋白的抗体识别位点，与传统的脱脂奶粉和BSA封闭相比信噪比更高;l性能可靠：无蛋白配方，与抗体无交叉反应;l应用范围广：无磷酸化蛋白，无生物素，尤其适合磷酸化特异抗体及生物素检测系统，包括Western Blot及Elisa检测;l增强抗体效果：使用本封闭液后，所需的最适抗体浓度低于常规使用浓度，可大大节省抗体使用量。【概述】本品专为快速高效封闭Western Blot转印膜及Elisa检测而设计，采用无蛋白配方，避免抗体与封闭剂的非特异结合，可最大程度地降低背景。同时，本封闭剂无内源的磷酸化蛋白及生物素，对磷酸化特异抗体及生物素检测也不会产生干扰。本封闭剂不与蛋白产生非特异性结合，因而只封闭膜而不会屏蔽样品蛋白的抗体识别位点，大大提高了抗体检测灵敏度。实验表明本封闭剂对许多抗体都有不同程度的信号增强作用。然而这种信号增强作用因抗体而异，对某一特定抗体，并不一定具有确定的信号增强作用。【使用建议】1.完成转膜后，将转印膜放入到杂交孵育盒中，加入10~20 mL TBS/T 或PBS/T;2.往TBS/T或PBS/T中加入1/4体积的无蛋白快速封闭液，置于摇床轻轻摇动，室温封闭约10min(即 配即用); 注意:使用本品通常封闭5~15min均可;经多种抗体的测试封闭10min的效果显著优于常规的BSA 封闭1 h。对于一些背景非常高的抗体，可以尝试将封闭时间延长为30~60 min。如有特殊需要也可4°C封闭过夜。3.封闭后的膜即可用于一抗孵育等后续实验。【注意事项】1.注意: 没有任何一种封闭剂能适合所有抗原和抗体检测系统。如出现本试剂不适合的抗体，请替换使用其它种类的封闭剂如BSA或脱脂奶粉等；2.本品仅用于科研用途，不得用于临床或诊断相关研究；3.为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
Vipack 病毒包装转染试剂
基本售价：360.00元
【操作方法】1. 对于贴壁细胞（以下均以6孔板为例，其它培养皿或培养板请根据相应面积换算）：a.将细胞培养于培养皿或培养板内，通常在铺板后1-2天内长到70-90%。b. 在转染前1-2小时，吸去细胞培养液，更换为新鲜的不含抗生素的完全培养液2ml。c. 取2-4μg待转染的质粒DNA (质粒总体积不宜超过20μl，若有多种质粒请混匀)，以质量体积比1：3加入转染试剂6~12μl（如2μg待转染的质粒DNA加入转染试剂6μl）。d.混匀后，室温孵育3-5分钟。e. 把DNA-转染试剂混合物中加入500μl opti-MEM（若无opti-MEM可使用无血清无双抗的DMEM或1640，具体根据转染细胞使用的培养基）,充分混匀后静置10-15分钟。f.后均匀滴加到整个6孔板内（加入前吸出原培养板中500μl培养基），并置于含5%二氧化碳的37ºC细胞培养箱内培养。g. 在转染后4-6小时左右换液，更换为2ml新鲜的完全培养液，继续培养。h.通常在转染约24-48小时后就可以检测到转染基因的表达。2. 对于悬浮细胞：a. 离心收集悬浮细胞，用PBS洗涤一次。b. 按照上面的步骤c)、d)、e）制备DNA-转染试剂-optiMEM混合物。c. 每106个细胞的沉淀，用500微升DNA-转染试剂-optiMEM混合物重新悬浮，室温放置15-20分钟。d. 在一个6孔板孔内加入1.5ml完全培养液，然后加入来自上一步的细胞-500微升DNA-转染试剂-optiMEM混合物，混匀。e. 在含5%二氧化碳的37ºC细胞培养箱内培养。f. 根据实验要求和转染试剂对于不同细胞的毒性不同，在4-6小时后离心收集细胞，用PBS洗一次，然后用2毫升完全培养 液重新悬浮细胞，继续培养。g. 通常在转染约24-48小时后就可以检测到转染基因的表达。
NewZOL LS 总RNA提取试剂(NewZOL LS Reagent) 200ml
基本售价：890.00元
功能与使用方法与life品牌的Trizol LS相似【保存条件】2-8℃长期保存【操作方法】I. 样本处理1. 组织样本处理：用匀浆器或其他类似设备匀化组织样本机械破坏装置，每 500μL 最多使用 50 mg 组织NewZOL LS。 对于 DNA 含量高的组织（例如脾脏），建议使用 25 mg 组织/ 500μL 试剂。2. 贴壁细胞样本处理：除去细胞培养基，通过向培养皿（直径 3.5 cm，10 cm2）中加入至少 1 mL NewZOLLS 并通过反复吸移来确保完全裂解。（根据培养皿面积而不是细胞数计算试剂量。试剂量不足将导致分离的 RNA 受到 DNA 污染。残留的匀浆可以在-20 至-80°C 下保存至少一年，以备后用。）3. 悬浮细胞样本处理：沉淀细胞，并通过添加 NewZOL LS 直接裂解。 每 5×106个细胞至少加入 500μLNewZOL LS，移液器吹打数次裂解细胞。（添加 NewZOL LS 之前请勿洗涤细胞，细胞洗涤可能会导致 RNA降解。）4. 液体样本处理：每 200μL 液体样品中加入 500μL NewZOL LS 进行均质化和裂解。对于小于 200μL 的样品体积，请添加 500μLNewZOL LS 并加水至最终体积为 700μL。5. 富含脂质样本处理：如上所述均质化富含脂质的样品。将样品以 12,000×g 离心 5 分钟。 离心后，样品顶部会出现一层脂肪。用移液器吸头尖端刺穿上层，然后将上清液转移到新管中。II. RNA 提取1. 每使用 500μLNewZOL LS 的裂解液中加入 200μL 无 RNase 的水至裂解液中。剧烈摇动样品 15 秒钟。在室温下孵育 5 分钟。（对于包含 50 mg 组织/ 500μL NewZOL LS 的样品，建议在室温下孵育 15 分钟。）2. 在室温下以12,000×g离心样品15分钟。含有DNA，蛋白质和多糖的半固体沉淀物形成在试管底部。RNA仍溶解在上清液中。3. 将 500μL 上清液转移至新管中。 勿吸太干净防止污染，在 DNA /蛋白质沉淀上方保留一小部分上清液。（含有 DNA，蛋白质和多糖的沉淀物占匀浆-水混合物总量的约 10％。）4. 加入等体积异丙醇，上下颠倒混匀以沉淀 RNA，在室温下孵育样品 10 分钟。5. 将样品以 12,000×g 离心 10 分钟，除去并丢弃上清液。通常，在管的底部以白色沉淀的形式获得 RNA。对于脾脏样品，RNA 在试管底部形成凝胶状膜。用乙醇洗涤后，膜变得更可见。6. 加入 500μL 75％ 乙醇（无 RNase 水配制）洗涤，轻弹管底使沉淀悬浮，上下颠倒混匀。对于较大的试管，按比例添加 75% 乙醇溶液。7. 将沉淀以 8,000×g 的速度离心 3 分钟。移液去除沉淀中的乙醇，重复乙醇洗涤步骤一次。静置 5-10 分钟待乙醇挥发，无需过份干燥成固体，干燥成固体的 RNA 沉淀不易溶解8. 将 RNA 沉淀溶于无 RNase 的水中，在室温下涡旋 3 分钟，以实现有效溶解。将得到的 RNA 进行检测或-65℃长期保存（若需更长时间保存请添加适量 RNA Chill（ES-8520））。【注意事项】1. RNA 酶污染注意事项：a. 提取过程用品均经过去 RNA 酶处理：玻璃制品可以 150 °C 烘烤 4 小时 ，塑料制品可浸泡于 0.5M NaOH 溶液后用清水冲洗并高压灭菌，吸头及离心管类尽量使用一次性无酶吸头及离心管b. 佩戴手套及口罩及护目镜：皮肤上常含有细菌和霉菌，可污染 RNA 制备，且同时是 RNA 酶来源，同时 New ZOL LS 对皮肤有一定毒性，建议佩戴手套及口罩及护目镜。c. 尽量于通风橱内提取：避免吸入提取过程中有毒物质。2. 安全性问题：a. 本品在与皮肤接触及吞咽有毒性，可导致烧伤。与皮肤接触后，应立即用洗涤剂和大量水冲洗。如感到身体不适，应立即就医
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