储存条件第一次使用前将RNase A加入溶液P1中,混匀后置于2-8℃保存,可稳定保存6个月。单独包装的RNaseA 在室温可稳定保存12个月。本试剂盒在室温 (15-25℃) 干燥条件下,可保存12个月;更长时间的保存可置于2-8℃。2-8℃保存时,若溶液产生沉淀,应在使用前置于37℃溶解沉淀。产品简介本试剂盒采用独特的硅胶膜吸附技术,高效专一地结合质粒DNA。同时采用特殊的去内毒素漂洗液和过滤器,可有效的去除内毒素、蛋白等杂质;整个提取过程仅需1h,方便快捷。使用本试剂盒提取的质粒DNA可适用于各种常规操作,包括酶切、PCR、测序、连接、转化和转染多种细胞等实验。推荐每次菌液使用量:高拷贝质粒推荐使用量为50 ml,得率一般在250-750 μg左右; 低拷贝质粒推荐使用量为100 ml,得率一般在100-300 μg左右。注意事项 请务必在使用本试剂盒之前阅读此注意事项。1.溶液P1在使用前先加入RNase A(将试剂盒中提供的RNase A全部加入),混匀,置于2-8℃保存。2.使用前先检查溶液P2、溶液P3是否出现结晶或者沉淀,如有结晶或者沉淀现象,可在37℃水浴中加热几分钟,即可恢复澄清。3.使用过滤器时请将推柄小心缓慢地从过滤管中抽出,避免滤膜因压力而松动。4.去内毒素溶液 ER 在多次开盖使用后,可能会有细微的颜色变化,不影响最终质粒提取效率和纯度。5.提取的质粒量与细菌培养浓度、质粒拷贝数等因素有关。如果所提质粒为低拷贝质粒或大于10 kb的大质粒,应加大菌体使用量,同时按比例增加P1、P2、P3的用量;洗脱缓冲液推荐在65-70℃水浴中预热(可以适当延长吸附和洗脱时间,以提高提取效率)。操作步骤使用前请先在漂洗液PW中加入无水乙醇,加入体积请参照瓶上的标签。1.取20-50 ml(根据培养菌体的浓度选择合适的量, 低拷贝推荐用100 ml) 过夜培养的菌液加入离心管,室温10,000 rpm(~11,500×g )离心3 min收集细菌,尽量吸除上清。注意:菌液较多时可以通过几次离心将菌体沉淀收集到一个离心管中,菌液量以能够充分裂解为佳,菌液过多会导致裂解不充分从而降低质粒的提取效率。2.向留有菌体沉淀的离心管中加入5 ml溶液P1 (请先检查是否已加入RNase A),使用移液器吸吐或涡旋振荡器彻底悬浮细菌细胞沉淀。注意:请务必彻底悬浮细菌沉淀,如果有未彻底混匀的菌块,会影响裂解效果,导致提取量和纯度偏低。对于低拷贝质粒,加大菌体用量的同时按比例增加P1、P2、P3的用量。3.向离心管中加入5 ml溶液P2,立即温和地上下翻转6-8次,室温放置4 min。(不要超过5min,)注意:温和地混匀,不要剧烈震荡,以免污染基因组DNA;所用时间不应超过5 min,以免质粒受到破坏;此时菌液应变得清亮粘稠, 如果未变得清亮,可能由于菌体过多,裂解不彻底,应减少菌体量。4.向离心管中加入5 ml溶液P3,立即温和地上下翻转6-8次,充分混匀,至溶液出现白色分散絮状沉淀。然后室温放置2-3 min左右。10,000 rpm(~11,500×g )离心10 min,使白色沉淀离至管底 (可适当增加离心时间) ,将全部溶液小心倒入过滤器CS2中 (请避免倒入大量沉淀而阻塞过滤器),慢慢推动推柄过滤,滤液收集在干净的15 ml的管中(自备) 。注意:加入溶液P3后应立即混匀,避免产生局部沉淀。如果离心后倒入过滤器CS2中的溶液有白色沉淀也不会影响过滤。如果菌体过多 (>50 ml) ,推荐延长离心时间至20-30 min。5.转移 4 ml 上一步所得滤液至吸附柱 CP3 中(吸附柱放入 15 ml 收集管中),10,000 rpm(~11,500×g )离心 2 min,倒掉收集管中的废液,将吸附柱 CP3 重新放回收集管中。重复该步骤直至所有滤液全部通过吸附柱 CP3。6.向吸附柱CP3中加入3.5 ml去内毒素漂洗液ER,放置2分钟,10,000 rpm(~11,500×g )离心2 min,弃掉收集管中的废液,将吸附柱重新放回收集管中。7.向吸附柱CP3中加入3.5 ml漂洗液PW(请检查是否已加入无水乙醇),10,000 rpm(~11,500×g )2 min,弃掉收集管中的废液,将吸附柱重新放回收集管中。8.重复操作步骤7。9.接着10,000 rpm (~11,500×g) 离心5 min,目的是将吸附柱中残余的漂洗液去除。注意:漂洗液中乙醇的残留会影响后续的酶促反应(酶切、PCR等)实验。为确保下游实验不受残留乙醇的影响,建议将吸附柱CP3开盖,置于室温放置数分钟,以彻底晾干吸附材料中残余的漂洗液。10.将吸附柱CP3置于一个干净的15 ml收集管中,向吸附膜的中间部位悬空滴加0.5-1 ml洗脱缓冲液TB,室温放置2-3 min,然后室温10,000 rpm(~11,500×g )离心2 min。将15 ml离心管中的洗脱液全部移入一个干净的1.5 ml离心管,-20℃保存。注意:洗脱缓冲液用量的多少主要是依据质粒的拷贝数以及实验所需要的浓度来确定,洗脱缓冲液体积不应少于0.5ml,体积过小影响回收效率。洗脱液的pH值对于洗脱效率有很大影响,若用ddH2O做洗脱液应保证其pH值在7.5-8.0 范围内,pH值低于7.0会降低洗脱效率。DNA产物应保存在-20℃,以防DNA降解。为了增加质粒的回收率,可将得到的溶液重新加入吸附柱中,室温放置2 min,10,000 rpm(~11,500×g ) 离心2 min,将质粒溶液收集到离心管中。
储存条件第一次使用前将RNase A加入溶液P1中,混匀后置于2-8℃保存,可稳定保存6个月。单独包装的RNaseA 在室温可稳定保存12个月。本试剂盒在室温 (15-25℃) 干燥条件下,可保存12个月;更长时间的保存可置于2-8℃。2-8℃保存时,若溶液产生沉淀,应在使用前置于37℃溶解沉淀。产品简介本试剂盒采用独特的硅胶膜吸附技术,高效专一地结合质粒DNA。同时采用特殊的结合液和去内毒素漂洗液,可有效的去除内毒素、蛋白等杂质;整个提取过程仅需1h,方便快捷。使用本试剂盒提取的质粒DNA可适用于各种常规操作,包括酶切、PCR、测序、连接、转化和转染多种细胞等实验。推荐每次菌液使用量:高拷贝质粒推荐使用量为50 ml,得率一般在250-750 μg左右; 低拷贝质粒推荐使用量为100 ml,得率一般在100-300 μg左右。注意事项 请务必在使用本试剂盒之前阅读此注意事项。1.溶液P1在使用前先加入RNase A(将试剂盒中提供的RNase A全部加入),混匀,置于2-8℃保存。2.使用前先检查溶液P2、溶液E3是否出现结晶或者沉淀,如有结晶或者沉淀现象,可在37℃水浴中加热几分钟,即可恢复澄清。3.去内毒素溶液 ER 在多次开盖使用后,可能会有细微的颜色变化,不影响最终质粒提取效率和纯度。4.提取的质粒量与细菌培养浓度、质粒拷贝数等因素有关。如果所提质粒为低拷贝质粒或大于10 kb的大质粒,应加大菌体使用量,同时按比例增加P1、P2、E3的用量;洗脱缓冲液推荐在65-70℃水浴中预热(可以适当延长吸附和洗脱时间,以提高提取效率)。操作步骤使用前请先在漂洗液PW中加入无水乙醇,加入体积请参照瓶上的标签。1.取20-50 ml(根据培养菌体的浓度选择合适的量,低拷贝推荐用100 ml)过夜培养的菌液加入离心管,室温10,000 rpm(~11,500×g)离心3 min收集细菌,尽量吸除上清。注意:菌液较多时可以通过几次离心将菌体沉淀收集到一个离心管中, 菌液量以能够充分裂解为佳,菌液过多会导致裂解不充分从而降低质粒的提取效率。2.向留有菌体沉淀的离心管中加入5 ml溶液P1 (请先检查是否已加入RNase A),使用移液器吸吐或涡旋振荡器彻底悬浮细菌细胞沉淀。注意:请务必彻底悬浮细菌沉淀,如果有未彻底混匀的菌块,会影响裂解效果,导致提取量和纯度偏低。对于低拷贝质粒,加大菌体用量的同时按比例增加P1、P2、E3的用量。3.向离心管中加入5 ml溶液P2,立即温和地上下翻转6-8次,室温放置2~4 min。注意:温和地混匀,不要剧烈震荡,以免污染基因组DNA;所用时间不应超过5 min,以免形成单股DNA而影响后续酶实验;此时菌液应变得清亮粘稠,如果未变得清亮,可能由于菌体过多,裂解不彻底,应减少菌体量。4.向离心管中加入5 ml溶液E3,立即温和地上下翻转6-8次,充分混匀,10,000 rpm(~11,500×g)离心10 min。注意:加入溶液E3后应立即混匀,避免产生局部沉淀。如果菌体过多 ( >50 ml) ,推荐延长离心时间至20-30 min。5.将上一步收集的上清液小心移至另一新的50ml离心管(自备),加入10 ml异丙醇(需自备),上下翻转6-8次,充分混匀,10,000 rpm (~11,500×g)离心10 min ,保留管底的白色沉淀(DNA pellet),丢弃上清液。6.向离心管(底部有离心所得的白色沉淀)加入1 ml溶液BCE,用移液器吸吐使白色沉淀(DNA pellet)完全溶解。7.将上一步所得溶液(DNA 溶液)转移至吸附柱 CP3 中(吸附柱放入 15 ml 收集管中),放置 1 min ,10,000rpm (~11,500×g)离心 2 min,倒掉收集管中的废液,将吸附柱 CP3 放回收集管中。8.向吸附柱 CP3 中加入 2ml 溶液 BCE 溶液,放置 2 min ,10,000 rpm (~11,500×g)离心 2 min,弃掉收集管中的废液,将吸附柱 CP3 放入收集管中。9.向吸附柱CP3中加入3.5 ml去内毒素漂洗液ER,放置2 min ,10,000 rpm (~11,500×g)离心2 min,弃掉收集管中的废液,将吸附柱CP3重新放回收集管中。10.向吸附柱CP3中加入3.5 ml漂洗液PW(请检查是否已加入无水乙醇),10,000 rpm (~11,500×g)离心2 min,弃掉收集管中的废液,将吸附柱CP3重新放回收集管中。11.重复操作步骤10 。12.接着10,000 rpm (~11,500×g)离心5 min,目的是将吸附柱中残余的漂洗液去除。注意:漂洗液中乙醇的残留会影响后续的酶促反应(酶切、PCR等)实验。为确保下游实验不受残留乙醇的影响,建议将吸附柱CP3开盖,置于室温放置数分钟,以彻底晾干吸附材料中残余的漂洗液。13.将吸附柱CP3置于一个干净的15 ml收集管中,向吸附膜的中间部位悬空滴加0.5-1 ml洗脱缓冲液TB,室温放置2 min,然后室温10,000 rpm (~11,500×g)离心2 min ,将15 ml离心管中的洗脱液全部移入一个干净的1.5 ml离心管,-20℃保存。注意:洗脱缓冲液用量的多少主要是依据质粒的拷贝数以及实验所需要的浓度来确定,洗脱缓冲液体积不应少于0.5ml,体积过小影响回收效率。洗脱液的pH值对于洗脱效率有很大影响,若用ddH2O做洗脱液应保证其pH值在7.5-8.0 范围内,pH值低于7.0会降低洗脱效率。DNA产物应保存在-20℃,以防DNA降解。为了增加质粒的回收率,可将得到的溶液重新加入吸附柱中,室温放置2 min,10,000 rpm (~11,500×g)离心2 min,将质粒溶液收集到离心管中。
储存条件本试剂盒在室温(15-25℃)干燥条件下,可保存12个月;更长时间的保存可置于2-8℃。(注意:当低温贮存时,使用前应先将试剂盒内的溶液在室温中放置一段时间,必要时可在37℃水浴中预热10 min,以平衡溶液温度)。单独包装的RNase A在室温可稳定保存12个月以上。加入RNase A后的溶液P1应置于2-8℃保存,可稳定保存6个月。产品简介本试剂盒采用独特的硅胶膜吸附技术,高效专一地结合质粒DNA。同时采用特殊的去内毒素溶液ER和过滤柱CS1,可有效的去除内毒素、蛋白等杂质;整个提取过程仅需1个小时,方便快捷。以下操作步骤适用于提取5-15 ml过夜培养的大肠杆菌,质粒提取得率和质量与宿主菌的种类和培养条件,细胞的裂解,质粒拷贝数,质粒的稳定性,抗生素等因素有关。使用本试剂盒提取的质粒DNA可适用于转染多种细胞及各种常规操作,包括酶切、PCR、测序、连接等实验。注意事项 请务必在使用本试剂盒之前阅读此注意事项。1.溶液 P1 在使用前先加入 RNase A(将试剂盒中提供的 RNase A 全部加入),混匀,置于 2-8℃保存。2.使用前先检查溶液 P2 和 P3 是否出现浑浊,如有混浊现象,可在 37℃水浴中加热几分钟,即可恢复澄清。3.所有离心步骤均为使用台式离心机室温下进行离心,速度为 12,000 rpm (~13,400×g )。4.去内毒素溶液 ER 在多次开盖使用后,可能会有细微的颜色变化,不影响最终质粒提取效率和纯度。5.提取的质粒量与细菌培养浓度、质粒拷贝数等因素有关。如果所提质粒为低拷贝质粒或大于 10 kb 的大质粒,应加大菌体使用量,同时按比例增加 P1、P2、P3 的用量,洗脱缓冲液应在 65-70℃预热。可以适当的延长吸附和洗脱的时间,以增加提取效率。操作步骤使用前请先在漂洗液PW中加入无水乙醇,加入体积请参照瓶上的标签。 本产品仅供科研使用,请勿用于临床诊断及其它用途1.取5-15 ml过夜培养的菌液加入离心管中,12,000 rpm (~13,400×g ) 离心1 min,尽量吸除上清。注意:菌液较多时可以通过几次离心将菌体沉淀收集到一个离心管中, 菌体量以能够充分裂解为佳,过多的菌体裂解不充分会降低质粒的提取效率。2.向留有菌体沉淀的离心管中加入500 μl溶液P1 (请先检查是否已加入RNaseA),使用移液器吸吐或涡旋振荡器彻底悬浮细菌细胞沉淀。注意:请务必彻底悬浮细菌沉淀,如果有未彻底混匀的菌块,会影响裂解,导致提取量和纯度偏低。3.向离心管中加入500 μl溶液P2,温和地上下翻转6-8次使菌体充分裂解。注意:温和地混合,不要剧烈震荡,以免污染基因组DNA。此时菌液应变得清亮粘稠,所用时间不应超过5 min,以免质粒受到破坏。如果未变得清亮,可能由于菌体过多,裂解不彻底,应减少菌体量。4.向离心管中加入500 μl溶液P3,立即温和地上下翻转6-8次,充分混匀,此时会出现白色絮状沉淀,然后室温放置10 min左右,12,000 rpm (~13,400×g ) 离心10 min,此时在离心管底部形成沉淀。注意:P3加入后应立即混合,避免产生局部沉淀。如果上清中还有微小白色沉淀,可再次离心后取上清。5.将上一步收集的上清液分次加入过滤柱CS1(过滤柱放入收集管中),12,000 rpm(~13,400×g ) 离心2min,小心地将过滤离心后收集管中得到的溶液分次加入吸附柱CP2中(吸附柱放入收集管中),(如果过滤柱中有残余的液体,说明步骤4的上清中杂质过多,可以延长离心的时间;如果离心后收集管底部有少量的沉淀,尽量地吸取上清)。6.12,000 rpm (~13,400×g ) 离心1 min,倒掉收集管中的废液,将吸附柱CP2放入收集管中。7.向吸附柱CP2加入750 ml 去内毒素溶液ER(已经加入异丙醇),静置2分钟使管柱膜平衡,室温12,000rpm (~13,400×g)离心1 min,倒掉收集管中的废液,将吸附柱重新放回收集管中。8.向吸附柱CP2中加入700 μl漂洗液PW(请先检查是否已加入无水乙醇),12,000 rpm(~13,400×g ) 离心1 min,倒掉收集管中的废液,将吸附柱CP2放入收集管中。注意:加入漂洗液PW后,如果室温静置2-5 min,有助于更好地去除杂质。9.重复操作步骤8.10.将吸附柱CP2重新放回收集管中,12,000 rpm (~13,400×g ) 离心2 min,目的是将吸附柱中残余的漂洗液去除。注意:漂洗液中乙醇的残留会影响后续的酶反应(酶切、PCR等)实验。为确保下游实验不受残留乙醇的影响,建议将吸附柱CP2开盖,置于室温放置数分钟,以彻底晾干吸附材料中残余的乙醇。11.将吸附柱CP2置于一个干净的离心管中,向吸附膜的中间部位悬空滴加100-300 μl洗脱缓冲液TB,室温放置2 min,12,000 rpm (~13,400×g ) 离心1 min将质粒溶液收集到离心管中。注意:洗脱缓冲液体积不应少于100μl,体积过小影响回收效率。洗脱液的pH值对于洗脱效率有很大影响,若后续做测序,需使用ddH2O做洗脱液,并保证其pH值在7.0-8.5范围内,pH值低于7.0会降低洗脱效率。且DNA产物应保存在-20℃,以防DNA降解。为了增加质粒的回收率,可将得到的溶液重新加入吸附柱中,室温放置2 min,12,000 rpm(~13,400×g) 离心2 min,将质粒溶液收集到离心管中。
储存条件该试剂盒置于室温(15-25℃)干燥条件下,可保存12个月,更长时间的保存可置于2-8℃。2-8℃保存条件下,若溶液产生沉淀,使用前应将试剂盒内的溶液在室温放置一段时间,必要时可在37℃水浴中预热10 min,以溶解沉淀。第一次使用前将RNase A加入溶液P1中,混匀后置于2-8℃保存,可稳定保存12个月以上。单独包装的RNase A 在室温可稳定保存12个月以上。产品简介本试剂盒采用碱裂解法裂解细胞,通过离心吸附柱在高盐状态下特异性地结合溶液中的DNA。离心吸附柱中采用的硅基质材料为本公司新型材料,可高效、专一吸附DNA,另外由于增加了过滤柱,可去除杂质蛋白及细胞中其他有机化合物。以下操作步骤适用于提取5-15ml过夜培养的大肠杆菌,质粒提取得率和质量与宿主菌的种类和培养条件,细胞的裂解,质粒拷贝数,质粒的稳定性,抗生素等因素有关。使用本试剂盒提取的质粒DNA可适用于转染多种细胞及各种常规操作,包括酶切、PCR、测序、连接等实验。注意事项 请务必在使用本试剂盒之前阅读此注意事项。1.溶液 P1 在使用前先加入 RNaseA(将试剂盒中提供的 RNase A 全部加入),混匀,置于 2-8℃保存。2.使用前先检查溶液 P2 和 P3 是否出现浑浊,如有浑浊现象,可在 37℃水浴中加热几分钟,即可恢复澄清。3.注意不要直接接触溶液 P2 和 P3,使用后应立即盖紧盖子。4.所有离心步骤均为使用台式离心机室温下进行离心,速度为 12,000 rpm (~13,400×g )。5.提取的质粒量与细菌培养浓度、质粒拷贝数等因素有关。如果所提质粒为低拷贝质粒或大于 10kb 的大质粒,应加大菌体使用量,同时按比例增加 P1、P2、P3 的用量,洗脱缓冲液应在 65-70℃预热。可以适当的延长吸附和洗脱的时间,以增加提取效率。操作步骤使用前请先在漂洗液PW中加入无水乙醇,加入体积请参照瓶上的标签。1.取5-15 ml过夜培养的菌液加入离心管中,12,000 rpm (~13,400×g ) 离心1 min,尽量吸除上清。注意:菌液较多时可以通过几次离心将菌体沉淀收集到一个离心管中, 菌体量以能够充分裂解为佳,过多的菌体裂解不充分会降低质粒的提取效率。2.向留有菌体沉淀的离心管中加入500 μl溶液P1(请先检查是否已加入RNase A),使用移液器吸吐或涡旋振荡器彻底悬浮细菌细胞沉淀。注意:请务必彻底悬浮细菌沉淀,如果有未彻底混匀的菌块,会影响裂解,导致提取量和纯度偏低。3.向离心管中加入500 μl溶液P2,温和地上下翻转6-8次使菌体充分裂解。注意:温和地混合,不要剧烈震荡,以免打断基因组DNA。此时菌液应变得清亮粘稠,所用时间不应超过5 min,以免质粒受到破坏。如果未变得清亮,可能由于菌体过多,裂解不彻底,应减少菌体量。4.向离心管中加入500 μl溶液P3,立即温和地上下翻转6-8次,充分混匀,此时会出现白色絮状沉淀。12,000 rpm (~13,400×g ) 离心10 min,此时在离心管底部形成沉淀。注意:P3加入后应立即混合,避免产生局部沉淀。如果上清中还有微小白色沉淀,可再次离心后取上清。5.将上一步收集的上清液分次加入过滤柱CS1(过滤柱放入收集管中),12,000 rpm(~13,400×g ) 离心2min,小心地将过滤离心后收集管中得到的溶液分次加入吸附柱CP2中(吸附柱放入收集管中),(如果过滤柱中有残余的液体,说明步骤4的上清中杂质过多,可以延长离心的时间;如果离心后收集管底部有少量的沉淀,尽量地吸取上清)。6.12,000 rpm (~13,400×g ) 离心1 min,倒掉收集管中的废液,将吸附柱CP2放入收集管中。7.向吸附柱CP2中加入700 μl漂洗液PW(请先检查是否已加入无水乙醇),12,000 rpm(~13,400×g ) 离心1 min,倒掉收集管中的废液,将吸附柱CP2放入收集管中。注意:加入漂洗液PW后,如果室温静置2-5 min,有助于更好地去除杂质。8.重复操作步骤7。9.将吸附柱CP2重新放回收集管中置于12,000 rpm (~13,400×g ) 离心2 min,目的是将吸附柱中残余的漂洗液去除。注意:漂洗液中乙醇的残留会影响后续的酶反应(酶切、PCR等)实验。为确保下游实验不受残留乙醇的影响,建议将吸附柱CP2开盖,置于室温放置数分钟,以彻底晾干吸附材料中残余的漂洗液。10.将吸附柱CP2置于一个干净的离心管中,向吸附膜的中间部位悬空滴加100-300 μl洗脱缓冲液TB,室温放置2 min, 12,000 rpm (~13,400×g ) 离心1 min将质粒溶液收集到离心管中。注意:洗脱缓冲液体积不应少于100μl,体积过小影响回收效率。洗脱液的pH值对于洗脱效率有很大影响,若后续做测序,需使用ddH2O做洗脱液,并保证其pH值在7.0-8.5范围内,pH值低于7.0会降低洗脱效率。且DNA产物应保存在-20℃,以防DNA降解。为了增加质粒的回收率,可将得到的溶液重新加入吸附柱中,室温放置2 min,12,000 rpm(~13,400×g)离心2 min,将质粒溶液收集到离心管中。
储存条件该试剂盒置于室温(15-25℃)干燥条件下,可保存12个月,更长时间的保存可置于2-8℃。2-8℃保存条件下,若溶液产生沉淀,使用前应将试剂盒内的溶液在室温放置一段时间,必要时可在37℃水浴中预热10 min,以溶解沉淀。第一次使用前将RNase A加入溶液P1中,混匀后置于2-8℃保存,可稳定保存12个月以上。单独包装的RNase A 在室温可稳定保存12个月以上。产品简介本试剂盒采用碱裂解法裂解细胞,通过离心吸附柱在高盐状态下特异性地结合溶液中的DNA。离心吸附柱中采用的硅基质材料为本公司新型材料,高效、专一吸附DNA,可去除杂质蛋白及细胞中其他有机化合物。以下操作步骤适用于提取5-15 ml过夜培养的大肠杆菌,质粒提取得率和质量与宿主菌的种类和培养条件,细胞的裂解,质粒拷贝数,质粒的稳定性,抗生素等因素有关。使用本试剂盒提取的质粒DNA可适用于各种常规操作,包括酶切、PCR、测序、连接、转化、文库筛选、体外翻译、转染一些常规的传代细胞等。注意事项 请务必在使用本试剂盒之前阅读此注意事项。1.溶液 P1 在使用前先加入 RNase A(将试剂盒中提供的 RNase A 全部加入),混匀,置于 2-8℃保存。2.使用前先检查溶液 P2 和 P3 是否出现浑浊,如有混浊现象,可在 37℃水浴中加热几分钟,即可恢复澄清。3.注意不要直接接触溶液 P2 和 P3,使用后应立即盖紧盖子。4.所有离心步骤均为使用台式离心机室温下进行离心,速度为 12,000 rpm (~13,400×g )。5.提取的质粒量与细菌培养浓度、质粒拷贝数等因素有关。如果所提质粒为低拷贝质粒或大于 10 kb 的大质粒,应加大菌体使用量,同时按比例增加 P1、P2、P3 的用量,洗脱缓冲液应在 65-70℃预热。可以适当的延长吸附和洗脱的时间,以增加提取效率。操作步骤使用前请先在漂洗液PW中加入无水乙醇,加入体积请参照瓶上的标签。1.取5-15 ml过夜培养的菌液加入离心管中,12,000 rpm (~13,400×g )离心1 min,尽量吸除上清。注意:菌液较多时可以通过几次离心将菌体沉淀收集到一个离心管中。收集的菌体量以能够充分裂解为佳,菌体过多裂解不充分会降低质粒的提取效率。2.向留有菌体沉淀的离心管中加入500 μl溶液P1(请先检查是否已加入RNase A),使用移液器吸吐或涡旋振荡器彻底悬浮细菌细胞沉淀。注意:如果有未彻底混匀的菌块,会影响裂解,导致提取量和纯度偏低。3.向离心管中加入500 μl溶液P2,温和地上下翻转6-8次使菌体充分裂解。注意:温和地混合,不要剧烈震荡,以免污染基因组DNA。此时菌液应变得清亮粘稠,所用时间不应超过5min,以免质粒受到破坏。如果菌液没有变清亮,可能是由于菌体过多,裂解不彻底,应减少菌体量。4.向离心管中加入500 μl溶液P3,立即温和地上下翻转6-8次,充分混匀,此时会出现白色絮状沉淀。12,000 rpm (~13,400×g ) 离心10 min,此时在离心管底部形成沉淀。注意:P3加入后应立即混合,避免产生局部沉淀。如果上清中还有微小白色沉淀,可再次离心后取上清。5.将上一步收集的上清液分次加入吸附柱CP2中(吸附柱放入收集管中,其容量为750-800ul),注意尽量不要吸出沉淀。12,000 rpm (~13,400×g )离心1 min,倒掉收集管中的废液,将吸附柱CP2放入收集管中。6.向吸附柱CP2中加入700 μl漂洗液PW(请先检查是否已加入无水乙醇),12,000 rpm(~13,400×g )离心1 min,倒掉收集管中的废液,将吸附柱CP2放入收集管中。7.重复操作步骤6。8.吸附柱CP2放入收集管中,12,000 rpm(~13,400×g )离心2 min,目的是将吸附柱中残余的漂洗液去除。注意:漂洗液中乙醇的残留会影响后续的酶反应(酶切、PCR等)实验。为确保下游实验不受残留乙醇的影响,建议将吸附柱CP2开盖,置于室温放置数分钟,以彻底晾干吸附材料中残余的乙醇。9.将吸附柱CP2置于一个干净的离心管中,向吸附膜的中间部位悬空滴加100-300 μl洗脱缓冲液TB,室温放置2-5 min,12,000 rpm(~13,400×g )离心2 min,将质粒溶液收集到离心管中。注意:洗脱缓冲液体积不应少于100μl,体积过小影响回收效率。洗脱液的pH值对于洗脱效率有很大影响,若后续做测序,需使用ddH2O做洗脱液,并保证其pH值在7.0-8.5范围内,pH值低于7.0会降低洗脱效率。且DNA产物应保存在-20℃,以防DNA降解。为了增加质粒的回收率,可将得到的溶液重新加入吸附柱中,室温放置2 min,12,000 rpm(~13,400×g) 离心2min,将质粒溶液收集到离心管中。
储存条件该试剂盒置于室温(15-25℃)干燥条件下,可保存12个月,更长时间的保存可置于2-8℃。2-8℃保存条件下,若溶液产生沉淀,使用前应将试剂盒内的溶液在室温放置一段时间,必要时可在37℃水浴中预热10 min,以溶解沉淀。第一次使用前将RNase A加入溶液P1中,混匀后置于2-8℃保存,可稳定保存12个月以上。单独包装的RNase A 在室温可稳定保存12个月以上。产品简介本试剂盒采用碱裂解法裂解细胞,再通过离心吸附柱在高盐状态下特异性地结合溶液中的DNA。离心吸附柱中采用的硅基质材料为本公司新型材料,高效、专一吸附DNA。由于增加了过滤柱,与普通的提取方法相比,本试剂盒可去除杂质蛋白及细胞中其他有机化合物,适用于提取1-5 ml过夜培养的大肠杆菌,质粒提取得率和质量与宿主菌的种类和培养条件,细胞的裂解,质粒拷贝数,质粒的稳定性,抗生素等因素有关。使用本试剂盒提取的质粒DNA可适用于转染多种细胞及各种常规操作,包括酶切、PCR、测序、连接等实验。注意事项 请务必在使用本试剂盒之前阅读此注意事项。1.溶液 P1 在使用前先加入 RNase A(将试剂盒中提供的 RNase A 全部加入),混匀,置于 2-8℃保存。2.使用前先检查溶液 P2 和 P3 是否出现浑浊,如有混浊现象,可在 37℃水浴中加热几分钟,即可恢复澄清。3.注意不要直接接触溶液 P2 和 P3,使用后应立即盖紧盖子。4.所有离心步骤均为使用台式离心机室温下进行离心,速度为 12,000 rpm (~13,400×g)。5.提取的质粒量与细菌培养浓度、质粒拷贝数等因素有关。操作步骤使用前请先在漂洗液PW中加入无水乙醇,加入体积请参照瓶上的标签。1.取1-5 ml过夜培养的菌液加入离心管中,12,000 rpm (~13,400×g )离心1 min,尽量吸除上清(菌液较多时可以通过几次离心将菌体沉淀收集到一个离心管中)。2.向留有菌体沉淀的离心管中加入250 μl溶液P1 (请先检查是否已加入RNase A),使用移液器吸吐或涡旋振荡器彻底悬浮细菌细胞沉淀。注意:如果有未彻底混匀的菌块,会影响裂解,导致提取量和纯度偏低。3.向离心管中加入250 μl溶液P2,温和地上下翻转6-8次使菌体充分裂解。注意:温和地混合,不要剧烈震荡,以免打断基因组DNA,造成提取的质粒中混有基因组DNA片断。此时菌液应变得清亮粘稠,所用时间不应超过5 min,以免质粒受到破坏。如果未变得清亮,可能由于菌体过多,裂解不彻底,应减少菌体量。4.向离心管中加入250 μl溶液P3,立即温和地上下翻转6-8次,充分混匀,此时会出现白色絮状沉淀。12,000 rpm (~13,400×g ) 离心10 min,用移液器小心地将上清转移到过滤柱CS1(过滤柱放入收集管中),注意尽量不要吸出沉淀。注意:P3加入后应立即混合,避免产生局部沉淀。如果上清中还有微小白色沉淀,可再次离心后取上清。5.12,000 rpm (~13,400×g )离心2 min,小心地将离心后收集管中得到的溶液转移到吸附柱CP1中(吸附柱放入收集管中),(如果过滤柱中有残余的液体说明步骤4吸取的上清中杂质过多,可以延长离心的时间; 如果离心后收集管底部有少量的沉淀,尽量的吸取上清)。6.12,000 rpm (~13,400×g ) 离心30-60 sec,倒掉收集管中的废液,将吸附柱CP1放入收集管中。7.向吸附柱CP1中加入700 μl漂洗液PW(请先检查是否已加入无水乙醇),12,000 rpm(~13,400×g ) 离心30-60 sec,倒掉收集管中的废液,将吸附柱CP1放入收集管中。8.重复操作步骤7。9.将吸附柱CP1放入收集管中,12,000 rpm (~13,400×g ) 离心2 min,目的是将吸附柱中残余的漂洗液去除。注意:漂洗液中乙醇的残留会影响后续的酶反应(酶切、PCR等)实验。为确保下游实验不受残留乙醇的影响,建议将吸附柱CP1开盖,置于室温放置数分钟,以彻底晾干吸附材料中残余的乙醇。10.将吸附柱CP1置于一个干净的离心管中,向吸附膜的中间部位滴加50-100 μl洗脱缓冲液TB,室温放置2 min,12,000 rpm (~13,400×g) 离心2 min将质粒溶液收集到离心管中。注意:洗脱缓冲液体积不应少于50μl,体积过小影响回收效率。洗脱液的pH值对于洗脱效率有很大影响,若后续做测序,需使用ddH2O做洗脱液,并保证其pH值在7.0-8.5范围内,pH值低于7.0会降低洗脱效率。且DNA产物应保存在-20℃,以防DNA降解。为了增加质粒的回收率,可将得到的溶液重新加入吸附柱中,室温放置2 min,12,000 rpm(~13,400×g) 离心2 min,将质粒溶液收集到离心管中。低拷贝或大质粒( >10kb)提取如果所提质粒为低拷贝质粒或大于10 kb的大质粒,应加大菌体使用量,使用5-10 ml过夜培养物,同时按照比例增加P1、P2、P3的用量,洗脱缓冲液TB应在65-70℃水浴预热,在吸附和洗脱时可以适当的延长时间,以增加提取效率。其它步骤相同。
储存条件该试剂盒置于室温(15-25℃)干燥条件下,可保存12个月,更长时间的保存可置于2-8℃。2-8℃保存条件下,若溶液产生沉淀,使用前应将试剂盒内的溶液在室温放置一段时间,必要时可在37℃水浴中预热10 min,以溶解沉淀。第一次使用前将RNase A加入溶液P1中,混匀后置于2-8℃保存,可稳定保存12个月以上。单独包装的RNase A 在室温可稳定保存12个月以上。产品简介本试剂盒采用碱裂解法裂解细胞,再通过离心吸附柱在高盐状态下特异性地结合溶液中的DNA。离心吸附柱中采用的硅基质材料为本公司新型材料,高效、专一吸附DNA。以下操作步骤适用于提取1-5ml过夜培养的大肠杆菌,质粒提取得率和质量与宿主菌的种类和培养条件,细胞的裂解,质粒拷贝数,质粒的稳定性,抗生素等因素有关。使用本试剂盒提取的质粒DNA可适用于各种常规操作,包括酶切、PCR、测序、连接、转化、文库筛选、体外翻译、转染一些常规的传代细胞等。注意事项 请务必在使用本试剂盒之前阅读此注意事项。1.溶液 P1 在使用前先加入 RNase A(将试剂盒中提供的 RNase A 全部加入),混匀,置于 2-8℃保存。2.使用前请先检查溶液 P2 和 P3 是否出现浑浊,如有混浊现象,可在 37℃水浴中加热几分钟,即可恢复澄清。3.注意不要直接接触溶液 P2 和 P3,使用后应立即盖紧盖子。4.所有离心步骤均为使用常规台式离心机室温下进行离心,速度为 12,000 rpm(~13,400×g )。5.提取的质粒量与细菌培养浓度、质粒拷贝数等因素有关。操作步骤使用前请先在漂洗液PW中加入无水乙醇,加入体积请参照瓶上的标签。1.取1-5 ml过夜培养的菌液加入离心管中,12,000 rpm(~13,400×g ) 离心1 min,尽量吸除上清(菌液较多时可以通过多次离心将菌体沉淀收集到一个离心管中)。2.向留有菌体沉淀的离心管中加入250 μl溶液P1(请先检查是否已加入RNase A),使用移液器吸吐或涡旋振荡器彻底悬浮细菌沉淀。注意:如果有未彻底混匀的菌块,会影响裂解,导致提取量和纯度偏低。3.向离心管中加入250 μl溶液P2,温和地上下翻转6-8次使菌体充分裂解。注意:温和地混合,不要剧烈震荡,以免打断基因组DNA,造成提取的质粒中混有基因组DNA片断。此时菌液应变得清亮粘稠,所用时间不应超过5 min,以免质粒受到破坏。如果未变得清亮,可能由于菌体过多,裂解不彻底,应减少菌体量。4.向离心管中加入250 μl溶液P3,立即温和地上下翻转6-8次,充分混匀,此时将出现白色絮状沉淀。12,000 rpm (~13,400×g )离心10 min。注意:P3加入后应立即混合,避免产生局部沉淀。如果上清中还有微小白色沉淀,可再次离心后取上清。5.将上一步收集的上清液用移液器转移到吸附柱CP1中 (吸附柱放入收集管中),注意尽量不要吸出沉淀。12,000 rpm (~13,400×g)离心30-60 sec,倒掉收集管中的废液,将吸附柱CP1放入收集管中。6.向吸附柱CP1中加入700 μl漂洗液PW(请先检查是否已加入无水乙醇),12,000 rpm(~13,400×g )离心30-60 sec,倒掉收集管中的废液,将吸附柱CP1放入收集管中。7.重复操作步骤6。8.将吸附柱CP1放入收集管中,12,000 rpm (~13,400×g) 离心2 min,目的是将吸附柱中残余的漂洗液去除。注意:漂洗液中乙醇的残留会影响后续的酶反应(酶切、PCR等)实验。为确保下游实验不受残留乙醇的影响,建议将吸附柱CP1开盖,置于室温放置数分钟,以彻底晾干吸附材料中残余的乙醇。9.将吸附柱CP1置于一个干净的离心管中,向吸附膜的中间部位滴加50-100 μl洗脱缓冲液TB,室温放置2min,12,000 rpm (~13,400×g) 离心2 min将质粒溶液收集到离心管中。注意:洗脱缓冲液体积不应少于50μl,体积过小影响回收效率。洗脱液的pH值对于洗脱效率有很大影响,若后续做测序,需使用ddH2O做洗脱液,并保证其pH值在7.0-8.5范围内,pH值低于7.0会降低洗脱效率。且DNA产物应保存在-20℃,以防DNA降解。为了增加质粒的回收率,可将得到的溶液重新加入吸附柱中,室温放置2 min,12,000 rpm(~13,400×g) 离心2 min,将质粒溶液收集到离心管中。低拷贝或大质粒( >10kb)提取如果所提质粒为低拷贝质粒或大于10 kb的大质粒,应加大菌体使用量,使用5-10 ml过夜培养物,同时按照比例增加P1、P2、P3的用量,洗脱缓冲液TB应在65-70℃水浴预热,在吸附和洗脱时可以适当的延长时间,以增加提取效率。其它步骤相同
储存条件 该试剂盒置于室温(15-25℃)干燥条件下,可保存12个月,更长时间的保存可置于2-8℃。2-8℃保存条件下,若溶液产生沉淀,使用前应将试剂盒内的溶液在室温放置一段时间,必要时可在37℃水浴中预热10 min,以溶解沉淀。第一次使用前将RNase A加入溶液P1中,混匀后置于2-8℃保存,可稳定保存12个月以上。单独包装的RNase A 在室温可稳定保存12个月以上。 产品简介 本试剂盒采用碱裂解法裂解细胞,再通过离心吸附柱在高盐状态下特异性地结合溶液中的DNA。离心吸附柱中采用的硅基质材料为本公司新型材料,高效、专一吸附DNA。以下操作步骤适用于提取1-5ml过夜培养的大肠杆菌,质粒提取得率和质量与宿主菌的种类和培养条件,细胞的裂解,质粒拷贝数,质粒的稳定性,抗生素等因素有关。 使用本试剂盒提取的质粒DNA可适用于各种常规操作,包括酶切、PCR、测序、连接、转化、文库筛选、体外翻译、转染一些常规的传代细胞等。 注意事项 请务必在使用本试剂盒之前阅读此注意事项。 1.溶液 P1 在使用前先加入 RNase A(将试剂盒中提供的 RNase A 全部加入),混匀,置于 2-8℃保存。 2.使用前请先检查溶液 P2 和 P3 是否出现浑浊,如有混浊现象,可在 37℃水浴中加热几分钟,即可恢复澄 清。 3.注意不要直接接触溶液 P2 和 P3,使用后应立即盖紧盖子。 4.所有离心步骤均为使用常规台式离心机室温下进行离心,速度为 12,000 rpm(~13,400×g )。 5.提取的质粒量与细菌培养浓度、质粒拷贝数等因素有关。 操作步骤 使用前请先在漂洗液PW中加入无水乙醇,加入体积请参照瓶上的标签。 1.取1-5 ml过夜培养的菌液加入离心管中,12,000 rpm(~13,400×g ) 离心1 min,尽量吸除上清(菌液较多时可以通过多次离心将菌体沉淀收集到一个离心管中)。 2.向留有菌体沉淀的离心管中加入250 μl溶液P1(请先检查是否已加入RNase A),使用移液器吸吐或涡旋振荡器彻底悬浮细菌沉淀。 注意:如果有未彻底混匀的菌块,会影响裂解,导致提取量和纯度偏低。 3.向离心管中加入250 μl溶液P2,温和地上下翻转6-8次使菌体充分裂解。 注意:温和地混合,不要剧烈震荡,以免打断基因组DNA,造成提取的质粒中混有基因组DNA片断。此时 菌液应变得清亮粘稠,所用时间不应超过5 min,以免质粒受到破坏。如果未变得清亮,可能由于菌体 过多,裂解不彻底,应减少菌体量。 4.向离心管中加入250 μl溶液P3,立即温和地上下翻转6-8次,充分混匀,此时将出现白色絮状沉淀。12,000 rpm (~13,400×g )离心10 min。 注意:P3加入后应立即混合,避免产生局部沉淀。如果上清中还有微小白色沉淀,可再次离心后取上 清。 5.将上一步收集的上清液用移液器转移到吸附柱CP1中 (吸附柱放入收集管中),注意尽量不要吸出沉淀。12,000 rpm (~13,400×g)离心30-60 sec,倒掉收集管中的废液,将吸附柱CP1放入收集管中。 6.向吸附柱CP1中加入700 μl漂洗液PW(请先检查是否已加入无水乙醇),12,000 rpm(~13,400×g )离心30-60 sec,倒掉收集管中的废液,将吸附柱CP1放入收集管中。 7.重复操作步骤6。 8.将吸附柱CP1放入收集管中,12,000 rpm (~13,400×g) 离心2 min,目的是将吸附柱中残余的漂洗液去 除。 注意:漂洗液中乙醇的残留会影响后续的酶反应(酶切、PCR等)实验。为确保下游实验不受残留乙醇的影响,建议将吸附柱CP1开盖,置于室温放置数分钟,以彻底晾干吸附材料中残余的乙醇。 9.将吸附柱CP1置于一个干净的离心管中,向吸附膜的中间部位滴加50-100 μl洗脱缓冲液TB,室温放置2min,12,000 rpm (~13,400×g) 离心2 min将质粒溶液收集到离心管中。 注意:洗脱缓冲液体积不应少于50μl,体积过小影响回收效率。洗脱液的pH值对于洗脱效率有很大影响,若后续做测序,需使用ddH2O做洗脱液,并保证其pH值在7.0-8.5范围内,pH值低于7.0会降低洗脱效率。且DNA产物应保存在-20℃,以防DNA降解。为了增加质粒的回收率,可将得到的溶液重新加入吸附柱中,室温放置2 min,12,000 rpm(~13,400×g) 离心2 min,将质粒溶液收集到离心管中。 低拷贝或大质粒( >10kb)提取 如果所提质粒为低拷贝质粒或大于10 kb的大质粒,应加大菌体使用量,使用5-10 ml过夜培养物,同时按照比例增加P1、P2、P3的用量,洗脱缓冲液TB应在65-70℃水浴预热,在吸附和洗脱时可以适当的延长时间,以增加提取效率。其它步骤相同
产品简介:SDS-PAGE 上样缓冲液(SDS-PAGE Loading Buffer, 5X),是一种经过改良的以溴酚蓝为染料,5 倍浓缩的蛋白上样缓冲液,用于 SDS-PAGE 时蛋白样品的上样操作。不含传统的 β-巯基乙醇或 DTT,Genefist 上样缓冲液采用 TCEP 作为还原剂,稳定性更好、还原效果更优,并且无难闻气味!保存条件:-20℃保存,至少一年有效。使用说明:1、在室温或不超过 37℃的水浴中溶解蛋白上样缓冲液。水浴溶解后立即室温存放,尽量避免长时间置于水浴中。使用完毕后置于-20℃保存。2、按照每 4ul 蛋白样品加入 1ul 上样缓冲液的比例,混合蛋白样品和上样缓冲液。3、100℃或沸水浴加热 5-10 分钟,以充分变性蛋白。4、冷却到室温后,上样到 SDS-PAGE 胶加样孔内,开始电泳。注意事项: 由于含有变性剂,本品不适用于非变性胶的电泳 SDS-PAGE 蛋白上样缓冲液(5X)必须完全溶解后再使用。 如果起始时细胞或组织的用量较大,基因组 DNA 含量较高,“混合液”可适当延长加热时间。 本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗。
产品简介在常规的 Western blot 和 ELISA 实验中,需要用封闭试剂将膜或酶标板孔中的未被抗原或抗体占据的位点进行封闭, 通常的封闭试剂有 BSA,脱脂奶粉等,但是 BSA 中有少量的抗体残留,导致抗原/抗体之间的交叉反应,从而产生高背景,杂带多,或本底水平增高等影响。同样脱脂奶粉中含有少量的生物素和碱性磷酸酶残留,在使用生物素-亲和素系统和碱性磷酸酶标记的二抗时,也会使得背景高或本底水平增高,脱脂奶粉中含有的酪蛋白和碱性磷酸酶残留也使得其不适用于磷酸化蛋白的检测。本产品采用化学合成的高分子聚合物作为核心封闭试剂,能够避免 BSA,脱脂奶粉作为封闭试剂的缺陷,提高实验结果的精确性,增加条带清晰度;产品不含磷酸盐、叠氮钠或硫柳汞类防腐剂,但采用安全性更高的医疗防腐处理,可以长时间保存,减少了 western 或 ELISA实验中蛋白封闭液不耐保存现用现配的麻烦;本产品可提高免疫印迹反应的灵敏度,封闭时间仅需十分钟,大大缩短了实验过程,节省了宝贵实验时间。产品特色: 即用型封闭液,无需现用现配,4℃保质两年 封闭时间短,仅需 10 分钟 减少高背景和非特异性免疫反应,增强条带清晰度 适用所有抗体的封闭(ELISA、WB) 不含 BSA、脱脂奶粉等动物源蛋白 不含磷酸盐、叠氮钠或硫柳汞类防腐剂运输和保存条件:常温存储,有效期两年。操作步骤 : 取适量的无蛋白封闭液加入到合适的含有膜的容器中,将膜完全浸没,在室温或 37℃条件下,震荡约 10 分钟。 对于 ELISA 实验中,将无蛋白封闭液加入酶标板的每个孔中在室温或 37℃条件下,震荡约 10 分钟。 按照 Western blot 和 ELISA 实验的要求,继续进行下一步实验操作。注意事项1、使用后请旋紧瓶盖并放回 4℃存储。2、在进行封闭后可以使用 Genefist 的通用型抗体稀释液(GF1600)进行一抗和二抗的稀释,能进一步提高条带的清晰度,减少显色后的高背景和杂带的产生 。3、本品不含叠氮钠或硫柳汞类防腐剂,但还需小心操作避免皮肤直接接触。4、本试剂只能用于科研实验,请勿用于临床诊断及其它用途。
产品简介通用型抗体稀释液是一种即用型的,适合于稀释所有免疫抗体测定(Immunofluorescence, IHC, ELISA, WB)实验中的抗体。该试剂可用于一抗或二抗的稀释和配制,在 4℃保存和使用不少于六个月。稀释液中加入了多种抗体结合反应增强剂及稳定剂,能够增加抗体的溶解度和稳定性,增强免疫反应,降低非特异的背景颜色,提高实验的特异性和灵敏度,可反复使用,节约宝贵的抗体。试剂中不含有动物源的蛋白,适合于所有类型抗体稀释,包括 HRP,AP 标记的抗体。不含磷酸盐、叠氮钠或硫柳汞类防腐剂,安全性更高,。产品特色 即用型稀释液,无需配制 稀释后的抗体可以使用长达 6 个月 适用所有实验的抗体稀释(IF、IHC、ELISA、WB) 含抗体结合反应增强剂、稳定剂,效果更佳 不含 BSA、脱脂奶粉等动物源蛋白 不含磷酸盐、叠氮钠或硫柳汞类防腐剂运输和保存条件常温运输,4℃存储,有效期两年。操作步骤 : 根据抗体使用说明书,直接用本品对一抗或二抗进行适当倍数的稀释。 保存在抗体稀释液中的抗体可回收于 4℃保存,可反复使用多次,长达 6 个月以上,直至不能达到理想结果后丢弃。注意事项1、使用后请旋紧瓶盖,防止溶液挥发或与空气的物质发生化学反应,并放回 4℃保存。2、在进行抗体免疫反应前可以使用 Genefist 的高效 Western 封闭液(货号GF1815)进行封闭,能进一步提高条带的清晰度,减少显色后的高背景和杂带的产生 。3、本品不含叠氮钠或硫柳汞类防腐剂,但还需小心操作避免皮肤直接接触。4、本试剂只能用于科研实验,请勿用于临床诊断和其它用途。
产品简介通用型抗体稀释液是一种即用型的,适合于稀释所有免疫抗体测定(Immunofluorescence, IHC, ELISA, WB)实验中的抗体。该试剂可用于一抗或二抗的稀释和配制,在 4℃保存和使用不少于六个月。稀释液中加入了多种抗体结合反应增强剂及稳定剂,能够增加抗体的溶解度和稳定性,增强免疫反应,降低非特异的背景颜色,提高实验的特异性和灵敏度,可反复使用,节约宝贵的抗体。试剂中不含有动物源的蛋白,适合于所有类型抗体稀释,包括 HRP,AP 标记的抗体。不含磷酸盐、叠氮钠或硫柳汞类防腐剂,安全性更高,。产品特色 即用型稀释液,无需配制 稀释后的抗体可以使用长达 6 个月 适用所有实验的抗体稀释(IF、IHC、ELISA、WB) 含抗体结合反应增强剂、稳定剂,效果更佳 不含 BSA、脱脂奶粉等动物源蛋白 不含磷酸盐、叠氮钠或硫柳汞类防腐剂运输和保存条件常温运输,4℃存储,有效期两年。操作步骤 : 根据抗体使用说明书,直接用本品对一抗或二抗进行适当倍数的稀释。 保存在抗体稀释液中的抗体可回收于 4℃保存,可反复使用多次,长达 6 个月以上,直至不能达到理想结果后丢弃。注意事项1、使用后请旋紧瓶盖,防止溶液挥发或与空气的物质发生化学反应,并放回 4℃保存。2、在进行抗体免疫反应前可以使用 Genefist 的高效 Western 封闭液(货号GF1815)进行封闭,能进一步提高条带的清晰度,减少显色后的高背景和杂带的产生 。3、本品不含叠氮钠或硫柳汞类防腐剂,但还需小心操作避免皮肤直接接触。4、本试剂只能用于科研实验,请勿用于临床诊断和其它用途。
半干转膜系统快速转膜液(5X)Cat #. GF1816 / Size. 500 ml产品简介半干转膜系统快速转膜液 Western blot Rapid Transfer Buffer for semi-dry(5X)是 Genefist推出的一种 5 倍浓度的高效转膜液,能高效快速地将蛋白转移到印迹膜(PVDF 或硝酸纤维素膜)上。本转膜液使用过程中,无需再使用甲醇或乙醇等任何醇类试剂,且能在 5-15 分钟内完成转膜过程,快速、高效、安全!产品特色: 高效安全:不使用甲醇或乙醇等任何醇类试剂,减少有毒试剂使用; ˗ 快速稳定:能在 5-15 分钟完成转膜过程,产热量小,减少蛋白损失; 兼容性好:兼容 Laemmli 胶,预制胶,FastPAGE,Bis-Tris 胶等多种凝胶。运输和保存条件:常温运输,室温存储,有效期一年。操作步骤 :1、1X 快速转膜液的配制(100ml):取 20ml 快速转膜液(5×)+ 80ml 去离子水;2、做好转印三明治结构,然后转移至电泳槽中,设定恒压 20V,一般时间 5-15 分钟完成蛋白转膜。备注: PVDF 膜使用前要用无水甲醇润湿 30 秒以上。 转印电流建议设定恒压 20V,1mm 厚度的凝胶,一般 5 分钟可以将 150kD 以下蛋白完全转印;大于 150kD 蛋白 10-15 分钟即可完全转印。 凝胶的浓度影响转印的效率,对于胶浓度 7.5%,5-10 分钟即可完成转印;对于胶浓度 10%,,5-15 分钟即可完成转印;对于胶浓度大于 10%,建议延长至 8-20 分钟。注意事项1、使用本试剂前请仔细阅读说明书。2、本产品只能用于科研实验,请勿用于临床诊断及其它用途。
产品简介Genefist 快速转膜液(10X)是 Genefist 研发的一款 10 倍浓缩的高效转膜液,转膜过程无需使用甲醇,且仅需 20-30 分钟,就能快速、高效地将蛋白转移到印迹膜(PVDF 或硝纤膜)上。Genefist 快速转膜液(10X),快速、安全、高效!产品特色: 安全便捷:不使用甲醇,减少有毒试剂使用; 快速高效:能在 20-30 分钟完成转膜过程,产热量小,减少蛋白损失; 兼容性好:兼容 Laemmli 胶,预制胶,FastPAGE,Bis-Tris 胶等多种凝胶。运输和保存条件:常温运输,室温存储,有效期两年。操作步骤 :1、1X 快速转膜液的配制(1000 ml):取 100ml 快速转膜液(10x)+ 700ml 去离子水 + 200ml无水乙醇。2、做好转印三明治结构,然后转移至电泳槽中,设定恒流 400mA,转印 20-30 分钟完成蛋白转膜。注意:(1)PVDF 膜使用前要用甲醇润湿 30 秒以上。(2)转印电流建议设定恒流 400mA,一般 20 分钟即可将 150kD 以下蛋白完全转印,对于更大分子量蛋白,可适当延长 5-15 分钟转膜时间。注意事项1、为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。2、本产品只能用于科研实验,请勿用于临床诊断及其它用途。
Product Information GeneFist ™series3-color High Range Protein Marker(9-245 kDa)GF6619Size:250 µl × 15 µl per well for 100 applicationsStorage4°C for 3 months-20°C for 24 monthsLoading Volume• 3 μl or 5 μl per loading for clear visualizationduring electrophoresis on a 15-well or 10-wellmini-gel.• 1.5~2.5 μl per well for general Western blottingtransfer.• Apply more for a thicker (> 1.5 mm) or larger gel.DescriptionThe GF6619 GeneFist™ 3-color High Range ProteinMarker is a ready to use three-color protein standardwith 12 pre-stained proteins covering a wide range ofmolecular weights from 10 to 245 kDa in Tris-Glycinebuffer (9 to 235 kDa in Bis-Tris (MOPS) buffer and 10-235 kDa in Bis-Tris (MES) buffer). Proteins arecovalently coupled with different chromophores foreasy identification of bands, with two referenceproteins carrying enhanced intensity correspondingto a green at 25 kDa and red at 75 kDa, respectively,as separated on SDS-PAGE (Tris-Glycine buffer).The GF6619 GeneFist™ 3-color High Range ProteinMarker is designed for monitoring protein separationduring SDS-polyacrylamide gel electrophoresis,verification of Western transfer efficiency onmembranes (PVDF, nylon, or nitrocellulose) and forapproximating the size of proteins.The marker is supplied in gel loading buffer and isready to use. Do NOT heat, dilute, or add reducingagents before loading.ContentsApproximately 0.1~0.4 mg/ml of each protein in thebuffer (20 mM Tris-phosphate (pH 7.5 at 25°C), 2 %SDS, 0.2 mM Dithiothreitol, 3.6 M Urea, and 15 % (v/v)Glycerol).Guide for Molecular Weight EstimationMigration patterns and approximate MWs (kDa) ofGF6619 GeneFist™ 3-color High Range ProteinMarker in different electrophoresis conditions arelisted below:BandColorTRISGLYCINEBIS-TRIS(MOPS)BIS-TRIS(MES)1Blue2452352352Blue1801701703Blue1401301304Blue10093935Red7570726Blue6053537Blue4541428Blue3530309Green25222310Blue20181811Blue15141412Blue109103-color High Range Protein MarkerNote. The apparent molecular weight (kDa) of each protein has beendetermined by calibration against an unstained protein standard;supplemental data should be considered for more accurateadjustments in different electrophoresis conditions.Quality ControlUnder suggested conditions, GF6619 GeneFist™ 3-color High Range Protein Marker resolves 12 majorbands in SDS-PAGE (Tris-Glycine, MOPS, and MESbuffer) and after Western blotting transfer to anitrocellulose membrane.Other informationGENEFIST Technology, Inc. claims all warranties withrespect to this document, expressed or implied,including but not limited to those of merchantabilityor fitness for a particular purpose. In no event shallGENEFIST Technology, Inc. be liable, whether incontract, tort, warranty, or under any statute or anyother basis for special, incidental, indirect, punitive,multiple or consequential damages in connection withor arising from this document, including but notlimited to the use thereof.Caution: Not intended for human or animal diagnostic or therapeuticuses.Related ProductsGF6150 GeneFist All Blue Regular Range ProteinMarker, 250 µl × 2GF6160 GeneFist All Blue Regular Range PlusProtein Marker, 250 µl × 2GF6170 GeneFist All Blue Broad Range ProteinMarker, 250 µl × 2GF6240 GeneFist Pink Blue Protein Marker, 250 µl × 2GF6616 GeneFist 3-color Regular Range ProteinMarker, 250 µl × 2GF6619 GeneFist 3-color High Range ProteinMarker, 250 µl × 2GF6261 GeneFist Enhanced 3-color High RangeProtein Marker, 250 µl × 2GF6270 GeneFist 3-color Broad Range ProteinMarker, 250 µl × 2GF6280 GeneFist 3-color Extra Range ProteinMarker, 250 µl × 2GF6500 GeneFist 3-color Pre-stained Protein Ladder,Regular Range, 250 µl × 2GF6510 GeneFist 3-color Pre-stained ProteinLadder, High Range, 250 µl × 2GF6520 GeneFist 3-color Pre-stained ProteinLadder, Broad Range, 250 µl × 2GF2100 GeneFist Protein Fluorescent Staining Dye(Red, 1,000X), 1 mlGF5110 GeneFist 50 bp DNA Ladder, 500 µlGF5220 GeneFist 100 bp DNA Ladder II, 500 µlGF5310 GeneFist 1 KB (0.25-10 kb) DNA Ladder,500 µlGF5510 GeneFist Super Range DNA Ladder, (50 bp-25 kb), 500 µlGF3010 GeneFist Blue Light LED epi-illuminator,AC 100-240V, 50/60HzGF1100 GeneFist Western Marker I, 250 µlGeneFist Western Marker IFor research use only
Product Information GeneFist ™series3-color High Range Protein Marker(9-245 kDa)GF6619Size:250 µl × 15 µl per well for 100 applicationsStorage4°C for 3 months-20°C for 24 monthsLoading Volume• 3 μl or 5 μl per loading for clear visualizationduring electrophoresis on a 15-well or 10-wellmini-gel.• 1.5~2.5 μl per well for general Western blottingtransfer.• Apply more for a thicker (> 1.5 mm) or larger gel.DescriptionThe GF6619 GeneFist™ 3-color High Range ProteinMarker is a ready to use three-color protein standardwith 12 pre-stained proteins covering a wide range ofmolecular weights from 10 to 245 kDa in Tris-Glycinebuffer (9 to 235 kDa in Bis-Tris (MOPS) buffer and 10-235 kDa in Bis-Tris (MES) buffer). Proteins arecovalently coupled with different chromophores foreasy identification of bands, with two referenceproteins carrying enhanced intensity correspondingto a green at 25 kDa and red at 75 kDa, respectively,as separated on SDS-PAGE (Tris-Glycine buffer).The GF6619 GeneFist™ 3-color High Range ProteinMarker is designed for monitoring protein separationduring SDS-polyacrylamide gel electrophoresis,verification of Western transfer efficiency onmembranes (PVDF, nylon, or nitrocellulose) and forapproximating the size of proteins.The marker is supplied in gel loading buffer and isready to use. Do NOT heat, dilute, or add reducingagents before loading.ContentsApproximately 0.1~0.4 mg/ml of each protein in thebuffer (20 mM Tris-phosphate (pH 7.5 at 25°C), 2 %SDS, 0.2 mM Dithiothreitol, 3.6 M Urea, and 15 % (v/v)Glycerol).Guide for Molecular Weight EstimationMigration patterns and approximate MWs (kDa) ofGF6619 GeneFist™ 3-color High Range ProteinMarker in different electrophoresis conditions arelisted below:BandColorTRISGLYCINEBIS-TRIS(MOPS)BIS-TRIS(MES)1Blue2452352352Blue1801701703Blue1401301304Blue10093935Red7570726Blue6053537Blue4541428Blue3530309Green25222310Blue20181811Blue15141412Blue109103-color High Range Protein MarkerNote. The apparent molecular weight (kDa) of each protein has beendetermined by calibration against an unstained protein standard;supplemental data should be considered for more accurateadjustments in different electrophoresis conditions.Quality ControlUnder suggested conditions, GF6619 GeneFist™ 3-color High Range Protein Marker resolves 12 majorbands in SDS-PAGE (Tris-Glycine, MOPS, and MESbuffer) and after Western blotting transfer to anitrocellulose membrane.Other informationGENEFIST Technology, Inc. claims all warranties withrespect to this document, expressed or implied,including but not limited to those of merchantabilityor fitness for a particular purpose. In no event shallGENEFIST Technology, Inc. be liable, whether incontract, tort, warranty, or under any statute or anyother basis for special, incidental, indirect, punitive,multiple or consequential damages in connection withor arising from this document, including but notlimited to the use thereof.Caution: Not intended for human or animal diagnostic or therapeuticuses.Related ProductsGF6150 GeneFist All Blue Regular Range ProteinMarker, 250 µl × 2GF6160 GeneFist All Blue Regular Range PlusProtein Marker, 250 µl × 2GF6170 GeneFist All Blue Broad Range ProteinMarker, 250 µl × 2GF6240 GeneFist Pink Blue Protein Marker, 250 µl × 2GF6616 GeneFist 3-color Regular Range ProteinMarker, 250 µl × 2GF6619 GeneFist 3-color High Range ProteinMarker, 250 µl × 2GF6261 GeneFist Enhanced 3-color High RangeProtein Marker, 250 µl × 2GF6270 GeneFist 3-color Broad Range ProteinMarker, 250 µl × 2GF6280 GeneFist 3-color Extra Range ProteinMarker, 250 µl × 2GF6500 GeneFist 3-color Pre-stained Protein Ladder,Regular Range, 250 µl × 2GF6510 GeneFist 3-color Pre-stained ProteinLadder, High Range, 250 µl × 2GF6520 GeneFist 3-color Pre-stained ProteinLadder, Broad Range, 250 µl × 2GF2100 GeneFist Protein Fluorescent Staining Dye(Red, 1,000X), 1 mlGF5110 GeneFist 50 bp DNA Ladder, 500 µlGF5220 GeneFist 100 bp DNA Ladder II, 500 µlGF5310 GeneFist 1 KB (0.25-10 kb) DNA Ladder,500 µlGF5510 GeneFist Super Range DNA Ladder, (50 bp-25 kb), 500 µlGF3010 GeneFist Blue Light LED epi-illuminator,AC 100-240V, 50/60HzGF1100 GeneFist Western Marker I, 250 µlGeneFist Western Marker IFor research use only
Product Information GeneFist ™ series3-color Regular Range Protein Marker(9-180 kDa)GF6616Size:250 µl x 15 µl per well for 100 applicationsStorage4°C for 3 months-20°C for 24 monthsLoading Volume• 3 μl or 5 μl per loading for clear visualizationduring electrophoresis on a 15-well or 10-wellmini-gel.• 1.5~2.5 μl per well for general Western blottingtransfer.• Apply more for a thicker (> 1.5 mm) or larger gel.DescriptionThe GF6616 GeneFist™ 3-color Regular RangeProtein Marker is a ready to use three-color proteinstandard with 10 pre-stained proteins covering a widerange of molecular weights from 10 to 180 kDa (9 to170 kDa in Bis-Tris (MOPS) buffer and 10 to 170 kDain Bis-Tris (MES) buffer). Proteins are covalentlycoupled with a blue chromophore except for tworeference bands (one green and one red band at 25kDa and 75 kDa respectively) when separated on SDSPAGE (Tris-Glycine buffer).The GF6616 GeneFist™ 3-color Regular RangeProtein Marker is designed for monitoring proteinseparation during SDS-polyacrylamide gel electrophoresis, verification of Western transfer efficiencyon membranes, (PVDF, nylon, or nitrocellulose) andfor approximating the size of proteins.The marker is supplied in gel loading buffer and isready to use. Do NOT heat, dilute, or add reducingagents before loading.ContentsApproximately 0.1~0.4 mg/ml of each protein in thebuffer (20 mM Tris-phosphate (pH 7.5 at 25°C), 2 %SDS, 0.2 mM Dithiothreitol, 3.6 M Urea, and 15 % (v/v)Glycerol).Guide for Molecular Weight EstimationMigration patterns and approximate MWs (kDa) ofGF6616 GeneFist™ 3-color Regular Range ProteinMarker in different electrophoresis conditions arelisted below:BandColorTRISGLYCINEBIS-TRIS(MOPS)BIS-TRIS(MES)1Blue1801701702Blue1401301303Blue10093934Red7570725Blue6053536Blue4541427Blue3530308Green2522239Blue15141410Blue109103-color Regular Range Protein MarkerNote. The apparent molecular weight (kDa) of each protein has beendetermined by calibration against an unstained protein standard;supplemental data should be considered for more accurateadjustments in different electrophoresis conditions.Quality ControlUnder suggested conditions, GF6616 GeneFist™3-color Regular Range Protein Marker resolves 10major bands in SDS-PAGE (Tris-Glycine, MOPS, andMES buffer) and after Western blotting transfer to anitrocellulose membrane.Other informationGENEFIST Technology, Inc. claims all warranties withrespect to this document, expressed or implied,including but not limited to those of merchantabilityor fitness for a particular purpose. In no event shallGENEFIST Technology, Inc. be liable, whether incontract, tort, warranty, or under any statute or anyother basis for special, incidental, indirect, punitive,multiple or consequential damages in connection withor arising from this document, including but notlimited to the use thereof.Caution: Not intended for human or animal diagnostic or therapeuticuses.Related ProductsGF6150 GeneFist All Blue Regular Range ProteinMarker, 250 µl × 2GF6160 GeneFist All Blue Regular Range PlusProtein Marker, 250 µl × 2GF6170 GeneFist All Blue Broad Range ProteinMarker, 250 µl × 2GF6240 GeneFist Pink Blue Protein Marker, 250 µl × 2GF6616 GeneFist Enhanced 3-color Regular RangeProtein Marker, 250 µl × 2GF6619 GeneFist 3-color High Range ProteinMarker, 250 µl × 2GF6261 GeneFist Enhanced 3-color High RangeProtein Marker, 250 µl × 2GF6270 GeneFist 3-color Broad Range ProteinMarker, 250 µl × 2GF6280 GeneFist 3-color Extra Range ProteinMarker, 250 µl × 2GF6500 GeneFist 3-color Pre-stained Protein Ladder,Regular Range, 250 µl × 2GF6510 GeneFist 3-color Pre-stained ProteinLadder, High Range, 250 µl × 2GF6520 GeneFist 3-color Pre-stained ProteinLadder, Broad Range, 250 µl × 2GF2100 GeneFist Protein Fluorescent Staining Dye(Red, 1,000X), 1 mlGF5110 GeneFist 50 bp DNA Ladder, 500 µlGF5220 GeneFist 100 bp DNA Ladder II, 500 µlGF5310 GeneFist 1 KB (0.25-10 kb) DNA Ladder,500 µlGF5510 GeneFist Super Range DNA Ladder, (50 bp-25 kb), 500 µlGF3010 GeneFist Blue Light LED epi-illuminator,AC 100-240V, 50/60HzGF1100 GeneFist Western Marker I, 250 µlGeneFist Western Marker IFor research use only