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4×SDS-PAGE双色蛋白Loading buffer（DTT）
基本售价：40.00元
4×SDS-PAGE双色蛋白上样缓冲液（DTT）使用说明书【包装规格】产品编号产品名称包装ES-8153SDS-PAGE Dual Color Protein Loading Buffer,4×(with DTT)1ml/10ml/100ml 使用说明书1份【保存条件】建议分装冻存，避免反复冻融，-20℃，有效期1年【概述】4×SDS-PAGE双色蛋白上样缓冲液可保护蛋白质在样品制备步骤中免受热降解，并在SDS-PAGE运行期间防止pH值变化。一些蛋白质对在Tris缓冲液中电泳期间温度波动引起的pH变化敏感，优化后的上样缓冲液组分可防止在SDS-PAGE电泳之前的样品加热过程中以及电泳过程中蛋白质降解。SDS可与蛋白质结合使蛋白质-SDS复合物上带有大量的负电荷，这时蛋白质本身的电荷完全被SDS掩盖，消除了各种蛋白质本身电荷的差异；SDS还可以断开分子内和分子间的氢键，破坏蛋白质分子的二级和三级结构。DTT可以断开半胱氨酸残基之间的二硫键，破坏蛋白质结构，消除了蛋白结构之间的差异。最终无电荷及结构上差异的蛋白（亚单位），电泳速度只是与其分子量大小有关。上样缓冲液包含两种跟踪染料：蓝色（溴酚蓝），用于跟踪电泳的进度；粉红色（pyronin Y），用于在Western印迹过程中监测蛋白质向膜的转移。【使用建议】1. 室温解冻4×SDS-PAGE双色蛋白上样缓冲液。2. 请按每30μl蛋白样品加入10μl上样缓冲液的比例(4倍稀释)来使用。如果蛋白样品浓度过高，可用双蒸水稀释。3. 混匀后，100℃水浴加热5-10分钟，使蛋白变性。4. 冷却至室温后，10000-14000rpm离心2-5分钟，取上清直接上样电泳即可。【注意事项】1. DTT对人体有害，操作时请小心，并注意有效防护以避免直接接触人体或吸入体内。2. 为了您的安全与健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。3. 聚丙烯酰胺凝胶浓度为8%时溴酚蓝指示条带的位置大概在30kd左右， 胶浓度为12%时，约在20kd左右，胶浓度为15%时，大概在10kd。请根据自己目标条带来判断结果电泳时间。4. 蛋白上样缓冲液含有溴酚蓝、吡罗红指示剂，PH值受保存温度影响，在低温冻存状态下，溶液可能会呈现深棕色，不影响产品使用。5. 一般而言，吡罗红的迁移速度快于溴酚蓝。在较高百分比的SDS聚丙烯酰胺凝胶（例如15%）中，吡罗红染料的迁移速度比溴酚蓝慢。
SDS细胞裂解液
基本售价：210.00元
SDS lysis buffer【保存条件】 4℃保存，有效期 1 年。 【概述】 SDS 裂解液是一种较为强烈的细胞组织裂解液，可用于动物、植物的细胞或组织样品，也可以用于真菌或细菌样品。SDS 裂解液裂解得到的蛋白样品可以用于常规的 PAGE、Western、免疫沉淀(immunol precipitation，IP)、免疫共沉淀(co-IP)和 ELISA 等。 【使用建议】 1.对于培养细胞样品： a.取适当量的裂解液，在使用前数分钟内加入 PMSF，使 PMSF 的最终浓度为 1mM，或者根据实验需要加入适当的蛋白酶磷酸酶抑制剂混合物。 b.对于贴壁细胞：去除培养液，用 PBS、生理盐水或无血清培养液洗一遍(如果血清中的蛋白没有干扰，可以不洗)。按照 6 孔板每孔加入 150-250μl 裂解液的比例加入裂解液。用枪吹打数下，使裂解液和细胞充分接触。通常裂解液接触动物细胞 1-2 秒后，细胞就会被裂解。植物细胞宜在冰上裂解 2-10min。如果用于 ChIP，初步裂解后需在冰浴上继续裂解 10 分钟。 对于悬浮细胞： 离心收集细胞，轻轻涡旋或者弹击管底以把细胞尽量分散开。按照 6 孔板每孔细胞加入 150-250μl 裂解液的比例加入裂解液。再用手指轻弹以充分裂解细胞。如果细胞量较多，必需分装成 50-100 万细胞/管，然后再裂解。充分裂解后应没有明显的细胞沉淀。如果用于 ChIP，初步裂解后需在冰浴上继续裂解 10 分钟。 对于细菌或酵母： 对于 1ml 菌液或酵母液，离心去上清，如果有必要可以使用 PBS 洗涤一次，充分去除液体后，轻轻涡旋或者弹击管底以把细菌或酵母尽量弹散。加入 100-200μl 裂解液，轻轻涡旋或者弹击管底以混匀，冰上裂解 2-10min。如果希望获得更好的裂解效果，细菌和酵母可以分别使用溶菌酶和破壁酶(Lyticase)消化，然后再使用本裂解液进行裂解。 裂解液用量说明： 通常6孔板每孔细胞或者1ml的菌液或酵母液中的细菌和酵母量加入150μl裂解液已经足够，但如果细胞密度非常高可以适当加大裂解液的用量到 200μl 或 250μl。每100 万动物细胞用 100μl 本产品裂解后获得的上清，其蛋白浓度约为 2-4mg/ml，不同细胞所不同。c.充分裂解后，10000-14000g 离心 3-5 分钟，取上清，即可进行后续的 PAGE、Western 和ChIP 等操作。2.对于组织样品： a.把组织剪切成细小的碎片。 b.融解 SDS 裂解液，混匀。取适当量的裂解液，在使用前数分钟内加入 PMSF，使 PMSF 的最终浓度为 1mM，或者根据实验需要加入适当的蛋白酶磷酸酶抑制剂混合物。 c.按照每 20mg 组织加入 150-250μl 裂解液的比例加入裂解液。(如果裂解不充分可以适当添加更多的裂解液，如果需要高浓度的蛋白样品，可以适当减少裂解液的用量。) d.用玻璃匀浆器匀浆，或使用组织研磨仪研磨，直至充分裂解。也可以把组织样品冷冻后液氮研磨，研磨充分后加入裂解液进行裂解。如果用于 ChIP，初步裂解后需在冰浴上继续裂解 10 分钟。 e.充分裂解后，10000-14000g 离心 3-5 分钟，取上清，即可进行后续的 PAGE、Western 和ChIP 等操作。每 20mg 冻存的小鼠肝脏组织用 200μl 本裂解液裂解后获得的上清，其蛋白浓度约为 15-25mg/ml，不同状态的不同组织有所不同。 f.如果组织样品本身非常细小，可以适当剪切后直接加入裂解液裂解，通过强烈涡旋使样品裂解充分。然后同样离心取上清，用于后续实验。直接裂解的优点是比较方便，不必使用匀浆器或研磨设备，缺点是不如匀浆或研磨那样裂解得比较充分。【注意事项】 1. 为了您的安全与健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。 2. 本产品长时间低温存放可能会出现沉淀，可在 37ºC 水浴约 10 分钟以充分溶解沉淀。沉淀完全溶解混匀后即可正常使用。 3. 裂解样品的所有步骤都需在冰上或 4℃进行。 4. 该试剂仅用于科研领域，不宜用于临床诊断或其他用途。
RIPA裂解液 (中强度)
基本售价：180.00元
RIPA Lysis Buffer normal【保存条件】 -20℃保存，有效期 1 年，频繁使用可放置 4℃保存。 【概述】 RIPA 裂解液(RIPA Lysis Buffer)是一种传统的细胞组织快速裂解液。RIPA 裂解液裂解得到的蛋白样品可以用于常规的 Western、IP 和 ELISA 等。 RIPA 的本意是 Radio Immunoprecipitation Assay。RIPA 裂解液的配方有很多种，根据其裂解液的强度大致可以分为高强度、中强度、低强度三类。请根据不同需求选择不同强度RIPA 裂解液。 【使用建议】 如发现 RIPA 有沉淀，请放室温半小时或者常温水浴使沉淀溶解。根据使用量，取每 1mlRIPA 加入 10ul PMSF，使 PMSF 的最终浓度为 1mM。混匀备用（PMSF 现用现加）。 1. 样品前处理： a) 对于贴壁细胞：去除培养液，用 PBS、生理盐水或无血清培养液洗一遍。按照 6 孔板每孔细胞量加入 150-250μl 裂解液的比例加入裂解液。用枪吹打数下，使裂解液和细胞充分接触。 b) 对于悬浮细胞：离心收集细胞，用手指把细胞用力弹散。按照 6 孔板每孔细胞量加入150-250μl 裂解液的比例加入裂解液，再用手指轻弹以充分裂解细胞。充分裂解后应没有明显的细胞沉淀。如果细胞量较多，必需分装成 50-100 万细胞/管，然后再裂解。 c) 对于组织样品：把组织剪切成细小的碎片。按照每 20mg 组织加入 150-250μl 裂解液的比例加入裂解液。(如果裂解不充分可以适当添加更多的裂解液，如果需要高浓度的蛋白样品，可以适当减少裂解液的用量)。用玻璃匀浆器匀浆，直至充分裂解。 2. 后处理：将裂解后的样品 10000-14000g 离心 3-5 分钟，取上清，即可进行后续的蛋白浓度测定、SDS-PAGE、Western blotting 【注意事项】 1. 为了您的安全与健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。 2. 本产品长时间低温存放可能会出现沉淀，可在 37ºC 水浴约 10 分钟以充分溶解沉淀。沉淀完全溶解后即可正常使用。 3. 为保证最佳的使用效果，请尽量避免过多的反复冻融，可分装后使用。 4. 裂解样品的所有步骤都需在冰上或 4℃进行。 5. RIPA 裂解液的裂解产物中经常会出现一小团透明胶状物，属正常现象。该透明胶状物为含有基因组DNA等的复合物。在不检测和基因组DNA结合特别紧密的蛋白的情况下，可以直接离心取上清用于后续实验；如果需要检测和基因组结合特别紧密的蛋白，则可以通过超声处理打碎打散该透明胶状物，随后离心取上清用于后续实验。如果检测一些常见的转录因子，例如 NF-kappaB、p53 等时，通常不必进行超声处理，就可以检测到这些转录因子。 6. 该试剂仅用于科研领域，不宜用于临床诊断或其他用途
ChIP-Seq 核裂解液
基本售价：240.00元
ChIP-Seq Nuclear Lysis buffer【保存条件】 -20 ℃保存，有效期 12 个月 【概述】 本品适用于小片段（5-500bp）单链 DNA 的杂交反应，获得更优质的杂交双链 DNA 片段，如 shRNA、gRNA载体等构建。 【操作方法】 1. 收获细胞核后，将细胞核重悬于 3-5 倍体积的冰冷的 ChIP-Seq 核裂解缓冲液中（5 倍体积取决于细胞核提取过程中细胞裂解液用量，如细胞裂解液用量为 100µl 则加入 500µl ChIP-Seq 核裂解液） 2. 将试管在冰上孵育 20 分钟。 3．从每个样品中取 5 µL 等分试样，并用 15 µL TE 稀释以用于分析凝胶确认。（注：将剩余保存在冰上或冻-20 ℃，直到需要为止。该样品用于确认染色质在分离前是完整的。） 4. 将试管放入设定为 2°C 的超声浴中, 调节水位，使管子刚好接触杯垫的表面。。如用 Misonix 431A 对每个试管进行 300 µl 的超声处理非常稳定，因此我们建议将较大的样品分成多个试管进行超声处理。将至少两个和多达 8 个试管放入超声仪的试管支架中。 5. 用 10 秒的脉冲和 10 秒的静止时间以 20 的振幅对样品进行超声处理，总超声时间为 30 分钟。 6. 从超声仪中取出样品，并保存在冰上。 7. 取 5 µl 样品，并用 15 µl TE 稀释以用于分析凝胶。 8. 在 37°C 下，用 10 µg RNase A 样品 15 分钟。 9. 在 65°C 下用 20 µg 蛋白酶 K 样品 30 分钟。 10. 在 95°C 下反向交联 5 分钟，使样品缓慢冷却至室温。需要执行这些步骤以确保 DNA 在琼脂糖凝胶上的正确迁移。否则，将发生比预期高得多的分子量的涂污或迁移。 11. 将加样染料添加到每个样品中，并在 TAE 运行缓冲液中的 1％琼脂糖凝胶上分离样品。 12. 凝胶成像仪下观察琼脂糖凝胶上的 DNA 样品。剪切染色质的大小应在 200 至 500 bp 之间。 13. 若步骤 12 完成后鉴定可行，将步骤 6 中其余样品在 4°C 下以 16,000 g 的速度离心 10 分钟，以去除不溶物。 14. 将可溶的剪切染色质转移到新鲜的 1.5ml 离心管中。染色质可以在液氮中冷冻，并在-80°C 下保存直至需要。 15．按上述方法用 RNase A，蛋白酶 K 和交联逆转处理等分试样（步骤 8-10）。 16．使用 QIAquick PCR 纯化试剂盒纯化染色质，并使用 NanoDrop 等测量 DNA 浓度。 【注意事项】 1. 如果每次的使用量很小，可以适当分装后再使用，以免污染。 2. 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
30% SDS 溶液
基本售价：130.00元
30% SDS solution【保存条件】 室温保存，有效期 1 年 【概述】 SDS 即 Sodium dodecyl sulfate，中文名为十二烷基磺酸钠，也称十二烷基硫酸钠。常用生化试剂，用途广泛，可以用于 SDS-PAGE、细菌碱裂解等。30% SDS 溶液为 100ml 溶液中含有 30g SDS，该溶液用水配制。 【注意事项】 1. 本产品对人体有刺激性，操作时请小心，并注意适当防护以避免直接接触人体或吸入体内。 2. 为了您的安全与健康，请穿实验服并戴一次性手套操作
20% SDS 溶液
基本售价：80.00元
20% SDS solution【保存条件】 室温保存，有效期 1 年 【概述】 SDS 即 Sodium dodecyl sulfate，中文名为十二烷基磺酸钠，也称十二烷基硫酸钠。常用生化试剂，用途广泛，可以用于 SDS-PAGE、细菌碱裂解等。20% SDS 溶液为 100ml 溶液中含有 20g SDS，该溶液用水配制。 【注意事项】 1. 本产品对人体有刺激性，操作时请小心，并注意适当防护以避免直接接触人体或吸入体内。 2. 为了您的安全与健康，请穿实验服并戴一次性手套操作
5% SDS 溶液
基本售价：50.00元
5% SDS solution【保存条件】 室温保存，有效期 1 年 【概述】 SDS 即 Sodium dodecyl sulfate，中文名为十二烷基磺酸钠，也称十二烷基硫酸钠。常用生化试剂，用途广泛，可以用于 SDS-PAGE、细菌碱裂解等。5% SDS 溶液为 100ml 溶液中含有 5g SDS，该溶液用水配制。 【注意事项】 1. 本产品对人体有刺激性，操作时请小心，并注意适当防护以避免直接接触人体或吸入体内。 2. 为了您的安全与健康，请穿实验服并戴一次性手套操作
pH 10.01校准液
基本售价：80.00元
pH Buffer Solution（pH 10.01）【保存条件】 室温保存，有效期 1 年，4℃保存可延长有效期。 【概述】 pH 校准液的 pH 值是已知的，并达到规定的准确度，其 pH 值有良好的复现性和稳定性，具有较大的缓冲容量，较小的稀释值和较小的温度系数。该 pH 校准液常用于 pH 计的定位和斜率校准，其 pH 值准确度范围在±0.01。pH 10.01 校准液是特指在 25℃下，pH=10.01。 【注意事项】 1. 使用过程中应该避免污染。 2. 显示 pH 校准数值时，pH 值会随温度不同而不同，具体如参考附录。 3. 为了您的安全与健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。 【附录】 不同温度下，pH 校准液对应的 pH 值：
pH 9.18校准液
基本售价：80.00元
pH Buffer Solution（pH 9.18）【保存条件】 室温保存，有效期 1 年，4℃保存可延长有效期。 【概述】 pH 校准液的 pH 值是已知的，并达到规定的准确度，其 pH 值有良好的复现性和稳定性，具有较大的缓冲容量，较小的稀释值和较小的温度系数。该 pH 校准液常用于 pH 计的定位和斜率校准，其 pH 值准确度范围在±0.01。pH 9.18 校准液是特指在 25℃下，pH=9.18。 【注意事项】 1. 使用过程中应该避免污染。 2. 显示 pH 校准数值时，pH 值会随温度不同而不同，具体如参考附录。 3. 为了您的安全与健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。 【附录】 不同温度下，pH 校准液对应的 pH 值：
pH 7.00校准液
基本售价：80.00元
pH Buffer Solution（pH 7.00）【保存条件】 室温保存，有效期 1 年，4℃保存可延长有效期。 【概述】 pH 校准液的 pH 值是已知的，并达到规定的准确度，其 pH 值有良好的复现性和稳定性，具有较大的缓冲容量，较小的稀释值和较小的温度系数。该 pH 校准液常用于 pH 计的定位和斜率校准，其 pH 值准确度范围在±0.01。pH 7.00 校准液是特指在 25℃下，pH=7.00。 【注意事项】 1. 使用过程中应该避免污染。 2. 显示 pH 校准数值时，pH 值会随温度不同而不同，具体如参考附录。 3. 为了您的安全与健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。 【附录】 不同温度下，pH 校准液对应的 pH 值：
pH 6.86校准液
基本售价：80.00元
pH Buffer Solution（pH 6.86）【保存条件】 室温保存，有效期 1 年，4℃保存可延长有效期。【概述】pH 校准液的 pH 值是已知的，并达到规定的准确度，其 pH 值有良好的复现性和稳定性，具有较大的缓冲容量，较小的稀释值和较小的温度系数。该 pH 校准液常用于 pH 计的定位和斜率校准，其 pH 值准确度范围在±0.01。pH 6.86 校准液是特指在 25℃下，pH=6.86。【注意事项】 1. 使用过程中应该避免污染。2. 显示 pH 校准数值时，pH 值会随温度不同而不同，具体如参考附录。3. 为了您的安全与健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。【附录】 不同温度下，pH 校准液对应的 pH 值：
pH 4.01校准液
基本售价：80.00元
pH Buffer Solution（pH 4.01）【保存条件】 室温保存，有效期 1 年，4℃保存可延长有效期。 【概述】 pH 校准液的 pH 值是已知的，并达到规定的准确度，其 pH 值有良好的复现性和稳定性，具有较大的缓冲容量，较小的稀释值和较小的温度系数。该 pH 校准液常用于 pH 计的定位和斜率校准，其 pH 值准确度范围在±0.01。pH 4.01 校准液是特指在 25℃下，pH=4.01。 【注意事项】 1. 使用过程中应该避免污染。 2. 显示 pH 校准数值时，pH 值会随温度不同而不同，具体如参考附录。 3. 为了您的安全与健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。 【附录】 不同温度下，pH 校准液对应的 pH 值：
pH 4.00校准液
基本售价：80.00元
pH Buffer Solution（pH 4.00）【保存条件】 室温保存，有效期 1 年，4℃保存可延长有效期。 【概述】 pH 校准液的 pH 值是已知的，并达到规定的准确度，其 pH 值有良好的复现性和稳定性，具有较大的缓冲容量，较小的稀释值和较小的温度系数。该 pH 校准液常用于 pH 计的定位和斜率校准，其 pH 值准确度范围在±0.01。pH 4.00 校准液是特指在 25℃下，pH=4.00。 【注意事项】 1. 使用过程中应该避免污染。 2. 显示 pH 校准数值时，pH 值会随温度不同而不同，具体如参考附录。 3. 为了您的安全与健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。 【附录】 不同温度下，pH 校准液对应的 pH 值：
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