Annexin V-Elab Fluor Violet 450 / PI细胞凋亡检测试剂盒
产品货号:E-EL-H0818c 中文名:人补体成分3a(C3a)酶联免疫吸附测定试剂盒别称:C3a-desArg, ASP用途 该试剂盒用于体外定量检测Human 血清,血浆或其他生物体液中C3a浓度检测原理 本试剂盒采用双抗体夹心ELISA法。用抗人C3a抗体包被于酶标板上,实验时样品或标准品中的人C3a会与包被抗体结合,游离的成分被洗去。依次加入生物素化的抗人C3a抗体和辣根过氧化物酶标记的亲和素。抗人C3a抗体与结合在包被抗体上的人C3a结合、生物素与亲和素特异性结合而形成免疫复合物,游离的成分被洗去。加入显色底物(TMB),TMB在辣根过氧化物酶的催化下呈现蓝色,加终止液后变成黄色。用酶标仪在450nm波长处测OD值,C3a浓度与OD450值之间呈正比,通过绘制标准曲线计算出样品中C3a的浓度。反应类型 夹心法规格 96T反应时间 3.5h反应性 Human检测方法 Colormetric检测范围 0.31—20 ng/mL灵敏度 0.19 ng/mL样本体积 100μL样本类型 血清,血浆或其他生物体液特异性 可检测样本中的人C3a,且与其它相关蛋白无明显交叉反应。重复性 板内,板间变异系数均<10%。典型数据 由于实验操作条件的不同(如操作者、移液技术、洗板技术和稳定条件等),标准曲线的OD值会有所差异。以下数据和曲线仅供参考,实验者需根据自己的实验建立标准曲线。(ng/mL) O.D Average Corrected 202.2782.3322.3052.249101.4661.5241.4951.43950.9240.8880.9060.852.50.4180.4520.4350.3791.250.2510.2290.240.1840.630.1530.1490.1510.0950.310.1030.1070.1050.04900.0530.0590.056--精密度板内精密度:低浓度样本,中浓度样本和高浓度样本分别在1块板子上检测20次。板间精密度:低浓度样本,中浓度样本和高浓度样本分别在3块板子上检测20次。Intra-assay Precision Inter-assay Precision Sample 123123n 202020202020Mean(ng/mL) 1.012.098.390.942.227.83Standarddeviation 0.070.090.300.050.130.24C V (%) 6.934.313.585.325.863.07回收率 分别往5个不同样本中添加已知浓度的目标蛋白,做回收实验,得出回收率范围和平均回收率。Sample Type Range (%) Average Recovery (%) Serum (n=8) 84-9790EDTA plasma (n=8) 91-10297Cell culture media (n=8) 87-9893线性 分别往5个样本中添加已知浓度的目标蛋白,做回收实验,得出回收率范围及平均回收率。将5个样本分别稀释2倍,4倍,8倍,16倍做回收实验,得出回收率范围及平均回收率。Serum (n=5) EDTA plasma (n=5) Cell culture media (n=5) 1:2Range (%)89-10791-10787-103Average (%)9798951:4Range (%)93-10581-9485-97Average (%)9987901:8Range (%)91-10382-9286-97Average (%)9787921:16Range (%)89-10685-9684-96Average (%)979191试剂盒组成及保存 未拆封的试剂盒可在2-8℃保存一周;如果一周以后才使用试剂盒,请拆开试剂盒按照下表中的条件分别保存各组分。中文名称 英文名称 规格 保存条件 ELISA酶标板(可拆卸)Micro ELISA Plate(Dismountable)8 孔×12 条-20℃,可存放6个月冻干标准品Reference Standard2 支浓缩生物素化抗体(100×)Concentrated Biotinylated Detection Ab1支 120 μL浓缩HRP酶结合物(100×)Concentrated HRP Conjugate1支 120 μL-20℃(避光),可存放6个月标准品&样品稀释液Reference Standard & Sample Diluent1瓶 20 mL2-8℃.可存放6个月生物素化抗体稀释液Biotinylated Detection Ab Diluent1瓶 14 mL酶结合物稀释液HRP Conjugate Diluent1瓶 14 mL浓缩洗涤液(25×)Concentrated Wash Buffer (25×)1瓶 30 mL底物溶液(TMB)Substrate Reagent1瓶 10 mL2-8℃(避光)反应终止液Stop Solution1瓶 10 mL2-8℃封板覆膜Plate Sealer5 张产品说明书Product Description1 份质检报告Certificate of Analysis1 份说明:所有试剂瓶盖须旋紧以防止蒸发和微生物的污染。试剂体积以实际发货版说明书为准。相关试剂在分装时会比标签上标明的体积稍多一些,请在使用时量取而非直接倒出。试验所需自备物品 1. 酶标仪(450nm波长滤光片)2. 高精度移液器,EP管及一次性吸头:0.5-10 μL, 2-20 μL, 20-200 μL, 200-1000 μL3. 37℃恒温箱,双蒸水或去离子水4. 吸水纸