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伊文思蓝染色液(0.5%)
产品细节图:
伊文思蓝染色液(0.5%)
品牌:ECOTOP | 货号:ED-8445-100ml
所属大类
: 试剂
所属小类
: 非常用试剂
品牌
: ECOTOP
规格
: 100ml
原价
: ¥580.00
促销价
:
¥580.00
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Evans Blue Stain Solution 0.5%
【保存条件】
室温保存,有效期 1 年
【概述】
伊文思蓝(Evans Blue)又称偶氮蓝,分子式 C34H24N6Na4O14S4,分子量为 960.80,CAS
号为 314-13-6。伊文思蓝属于一种常用的偶氮染料制剂,因其分子量大小和血浆白蛋白相近,
而且在血液中和血浆白蛋白有很高的亲和力,因此在神经科学研究中常被用于示踪观察血脑
屏障(BBB)的完整性,也用于细胞染色区分活细胞、死细胞,亦可测定血容量。
伊文思蓝和台盼蓝都是细胞活性染料,常用于检测细胞膜的完整性和细胞是否存活。活
细胞不会被染成蓝色,而死细胞会被染成淡蓝色。伊文思蓝染色后,通过显微镜下直接计数
或显微镜下拍照后计数,就可以对细胞存活率进行比较精确的定量,其中 0.5%为最常用的
浓度。活细胞因有外排功能而无法被伊文思蓝染色,因此可以通过此方法在显微镜下区分死
细胞和活细胞,但无法区分死亡和坏死。
【使用建议】
(一)血脑屏障通透性
1. 取处理后的实验动物(以小鼠为例),静脉注射 0.5%伊文思蓝染色液(可用 PBS 对产品进行 10
倍稀释)数秒至 1 分钟,小鼠眼睛、皮肤出现蓝色。0.5~1h 后处死小鼠,取目的脑组织。
2. 脑组织置于 1.5ml 离心管中,加入 1ml PBS, 迅速用组织匀浆器将脑组织制成匀浆,离心。
3. 取上清,加入等量三氯乙酸,4℃孵育 18~24h。该步骤亦可采用如下操作: 取上清,按上
清:丙酮=3:7 比例加入丙酮,室温孵育 24h。
4.1000g 离心 20~30 min 或 2000g 离心 15min。
5. 取上述溶液 1~2ml,用分光光度计测 620 nm 处吸光值(OD 值)。同时测定已知不同梯度的
标准依文思蓝的 OD 值,绘制标准曲线。根据标准曲线计算出待测待测样品的依文思蓝含
量。
(二)活细胞染色
1、取 100μl 重悬细胞到常规 1.5ml 或 0.5ml 离心管内,加入 100μl 0.5%伊文思蓝染液(可用
PBS 对产品进行 10 倍稀释)轻轻混匀,染色 3min(染色时间可适当延长,但不宜超过 10min)。
2、吸取少量经过染色后的细胞,用血细胞计数板计数。通常如果要比较精确地进行定量,
每个细胞样品至少数 500 个细胞,数出蓝色细胞和细胞总数。细胞存活率计算公式如下: 细胞存
活率=(细胞总数-蓝色细胞数)/细胞总数×100%
【注意事项】
1. 伊文思蓝对人体有轻微毒性,请小心防护。
2. 细胞染色时,注意凋亡小体偶尔也有拒染现象。
3. 血脑屏障通透性实验中,伊文思蓝染色液注射量应根据不同动物以及动物的重量调整。
4. 最好采用低温冷冻离心机进行离心。
5. 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
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伊文思蓝染色液(0.5%)的说明书1
1.
《Multifunction Sr, Co and F co-doped microporous coating on titanium of antibacterial, angiogenic and osteogenic activities》
作者:Jianhong Zhou ,Lingzhou Zhao 影响因子:4.259
期刊:《Scientific Reports 6, Article number: 29069 (2016)》 PMID:
27353337
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