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产品细节图:
产品货号:E-EL-H1241c
中文名:人二胺氧化酶(DAO)酶联免疫吸附测定试剂盒
别称:AOC1, ABP1, Amiloride Binding Protein 1, Amine Oxidase(Copper-Containing)
用途
该试剂盒用于体外定量检测Human 血清，血浆或其他生物体液中DAO浓度
检测原理
本试剂盒采用双抗体夹心ELISA法。用抗人DAO抗体包被于酶标板上，实验时样品或标准品中的人DAO会与包被抗体结合，游离的成分被洗去。依次加入生物素化的抗人DAO抗体和辣根过氧化物酶标记的亲和素。抗人DAO抗体与结合在包被抗体上的人DAO结合、生物素与亲和素特异性结合而形成免疫复合物，游离的成分被洗去。加入显色底物(TMB)，TMB在辣根过氧化物酶的催化下呈现蓝色，加终止液后变成黄色。用酶标仪在450nm波长处测OD值，DAO浓度与OD450值之间呈正比，通过绘制标准曲线计算出样品中DAO的浓度。
| 反应类型 | 夹心法 |
| 规格 | 96T |
| 反应时间 | 3.5h |
| 反应性 | Human |
| 检测方法 | Colormetric |
| 检测范围 | 3.13—200 ng/mL |
| 灵敏度 | 1.88 ng/mL |
| 样本体积 | 100μL |
| 样本类型 | 血清，血浆或其他生物体液 |
特异性
可检测样本中的人DAO，且与其它相关蛋白无明显交叉反应。
重复性
板内，板间变异系数均<10%。
典型数据
由于实验操作条件的不同（如操作者、移液技术、洗板技术和稳定条件等），标准曲线的OD值会有所差异。以下数据和曲线仅供参考，实验者需根据自己的实验建立标准曲线。
| (ng/mL) | O.D | Average | Corrected |
|---|---|---|---|
| 200 |
2.407 2.441 |
2.424 | 2.335 |
| 100 |
1.547 1.605 |
1.576 | 1.487 |
| 50 |
0.918 0.896 |
0.907 | 0.817 |
| 25 |
0.466 0.484 |
0.475 | 0.386 |
| 12.5 |
0.28 0.278 |
0.279 | 0.19 |
| 6.25 |
0.198 0.168 |
0.183 | 0.094 |
| 3.13 |
0.129 0.147 |
0.138 | 0.049 |
| 0 |
0.087 0.09 |
0.089 | -- |
|
精密度
板内精密度:低浓度样本,中浓度样本和高浓度样本分别在1块板子上检测20次。
板间精密度:低浓度样本,中浓度样本和高浓度样本分别在3块板子上检测20次。
| Intra-assay Precision | Inter-assay Precision | |||||
|---|---|---|---|---|---|---|
| Sample | 1 | 2 | 3 | 1 | 2 | 3 |
| n | 20 | 20 | 20 | 20 | 20 | 20 |
|
Mean (ng/mL) |
10.74 | 28.26 | 90.38 | 10.95 | 27.59 | 89.37 |
|
Standard deviation |
0.68 | 1.29 | 3.07 | 0.64 | 1.43 | 3.93 |
| C V (%) | 6.33 | 4.56 | 3.40 | 5.84 | 5.18 | 4.40 |
回收率
分别往5个不同样本中添加已知浓度的目标蛋白，做回收实验，得出回收率范围和平均回收率。
| Sample Type | Range (%) | Average Recovery (%) |
|---|---|---|
| Serum (n=8) | 92-106 | 98 |
| EDTA plasma (n=8) | 85-100 | 92 |
| Cell culture media (n=8) | 89-102 | 95 |
线性
分别往5个样本中添加已知浓度的目标蛋白，做回收实验，得出回收率范围及平均回收率。将5个样本分别稀释2倍，4倍，8倍，16倍做回收实验，得出回收率范围及平均回收率。
| Serum (n=5) | EDTA plasma (n=5) | Cell culture media (n=5) | ||
|---|---|---|---|---|
| 1:2 | Range (%) | 94-107 | 89-101 | 95-109 |
| Average (%) | 99 | 94 | 101 | |
| 1:4 | Range (%) | 87-103 | 85-100 | 88-103 |
| Average (%) | 94 | 91 | 95 | |
| 1:8 | Range (%) | 88-105 | 86-100 | 88-104 |
| Average (%) | 96 | 92 | 95 | |
| 1:16 | Range (%) | 89-101 | 82-96 | 82-96 |
| Average (%) | 94 | 88 | 88 |
试剂盒组成及保存
未拆封的试剂盒可在2-8℃保存一周；如果一周以后才使用试剂盒，请拆开试剂盒按照下表中的条件分别保存各组分。
| 中文名称 | 英文名称 | 规格 | 保存条件 |
|---|---|---|---|
| ELISA酶标板(可拆卸) | Micro ELISA Plate(Dismountable) | 8 孔×12 条 | -20℃，可存放6个月 |
| 冻干标准品 | Reference Standard | 2 支 | |
| 浓缩生物素化抗体(100×) | Concentrated Biotinylated Detection Ab | 1支 120 μL | |
| 浓缩HRP酶结合物(100×) | Concentrated HRP Conjugate | 1支 120 μL | -20℃(避光)，可存放6个月 |
| 标准品&样品稀释液 | Reference Standard & Sample Diluent | 1瓶 20 mL | 2-8℃.可存放6个月 |
| 生物素化抗体稀释液 | Biotinylated Detection Ab Diluent | 1瓶 14 mL | |
| 酶结合物稀释液 | HRP Conjugate Diluent | 1瓶 14 mL | |
| 浓缩洗涤液(25×) | Concentrated Wash Buffer (25×) | 1瓶 30 mL | |
| 底物溶液(TMB) | Substrate Reagent | 1瓶 10 mL | 2-8℃(避光) |
| 反应终止液 | Stop Solution | 1瓶 10 mL | 2-8℃ |
| 封板覆膜 | Plate Sealer | 5 张 | |
| 产品说明书 | Product Description | 1 份 | |
| 质检报告 | Certificate of Analysis | 1 份 |
说明：所有试剂瓶盖须旋紧以防止蒸发和微生物的污染。
试剂体积以实际发货版说明书为准。相关试剂在分装时会比标签上标明的体积稍多一些，请在使用时量取而非直接倒出。
试验所需自备物品
- 1. 酶标仪(450nm波长滤光片)
- 2. 高精度移液器，EP管及一次性吸头：0.5-10 μL, 2-20 μL, 20-200 μL, 200-1000 μL
- 3. 37℃恒温箱，双蒸水或去离子水
- 4. 吸水纸
暂时没有说明书
1.《Multifunction Sr, Co and F co-doped microporous coating on titanium of antibacterial, angiogenic and osteogenic activities》
作者：Jianhong Zhou ,Lingzhou Zhao 影响因子：4.259
期刊：《Scientific Reports 6, Article number: 29069 (2016)》 PMID：27353337
作者：Jianhong Zhou ,Lingzhou Zhao 影响因子：4.259
期刊：《Scientific Reports 6, Article number: 29069 (2016)》 PMID：27353337
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